Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: n havaitsemiseksi

Hepatiitti C on vakava virustauti, jota esiintyy potilaan kehossa bakteerien, kuten HCV: n, vaikutuksesta. Kehitysasteesta riippuen tällainen patologia voi edetä ilman oireita tai ilmetä keltaisuutena, vähentyneenä aktiivisuutena ja muina toiminnallisina häiriöinä. Samanaikaisesti tämä vaiva voidaan parantaa vain muutaman ensimmäisen viikon aikana, kun sen taudinaiheuttaja on itämisaikana. Hepatiitti C: n kvalitatiivinen analyysi voi diagnosoida infektion alkuvaiheessa.

Yleistä hepatiitti C: stä

Luokan C hepatiittia pidetään vaarallisimpana kaikentyyppisissä viruspatologioissa, koska sillä on erittäin suuri taipumus mutaatioihin. Kun kehossa on RNA-komponentit, niiden rakenne muuttuu jatkuvasti, minkä vuoksi immuunijärjestelmä ei pysty tuottamaan itsenäisesti oikeita vasta-aineita taudin luonnolliseen parantamiseen. Tämä mahdollistaa infektion leviämisen ilman paljon esteitä..

Muutaman viikon kuluttua virus mutatoituu sellaiseen tilaan, että henkilö alkaa tuntea ensimmäiset oireet, jotka ilmenevät:

  • Ajoittainen huimaus;
  • Pahoinvointi tai jopa oksentelu;
  • Krooninen väsymys;
  • Kipu oikeassa hypochondriumissa;
  • Kohonnut ruumiinlämpö.


Pahenemisvaiheen jälkeen tauti muuttuu krooniseksi. Lääkehoidon avulla potilas voi tukea häntä vain inkubointijakson aikana välttäen toistuvia uusiutumisia.

Indikaatiot diagnostiikkaan

Hepatiitti C -viruksen RNA-solujen kvalitatiivista tutkimusta ei suoriteta potilaan pyynnöstä, viitteitä tällaisesta menettelystä voivat olla vain:

  • Biopsian avulla kasvatettujen kudosten tutkimus;
  • Leukemioiden ja pahanlaatuisten kasvainten tutkimus;
  • Organismin diagnoosi geneettisten patologioiden esiintymisen varalta;
  • Henkilön tunnistaminen vertaamalla potilaan biologisia nesteitä käytettävissä oleviin biomateriaaleihin;
  • Virustartunnan aiheuttajan (sekahepatiitti) havaitseminen.

Lisäksi RNA-analyysi pystyy osoittamaan arvion nykyisen hoidon tehokkuudesta, mikä on erittäin tärkeää virussairauden hoidossa..

Mikä on PCR-analyysi

Polymeraasiketjureaktion tutkimus on syvällinen verianalyysi, joka suoritetaan RNA-viruksen solujen havaitsemiseksi siinä. Suunnasta riippuen tämä menettely voi näyttää:

  • Hepatiitin esiintyminen tai puuttuminen elimistössä (kvalitatiivinen PCR-tyyppi);
  • Immuunijärjestelmän viruskuormitus (kvantitatiivinen testi, joka osoittaa veren ribonukleiinihappopitoisuuden);
  • Nykyinen taudin genotyyppi (genotyypitys).

Kaikista yllä olevista testeistä vain ensimmäinen on pakollinen. Dekoodauksen tulosten perusteella lääkäri voi saada lisätietoja nykyisestä vaivasta..

Tärkeimmät tutkimuksen edut

Jos verrataan PCR-analyysiä sellaisiin menettelyihin kuin: UAC, ELISA ja ultraääniskannaus, ensimmäisellä testillä on useita ominaisia ​​etuja:

  • Tulosten nopea käsittely;
  • Kyky tutkia melkein kaikkia ihmisen biologisia nesteitä (hiki, kyyneleet, veri, kaavinta limakalvosta ja jopa ihon epiteeli);
  • Viruksen kuormitusindikaattorin läsnäolo;
  • Testimateriaalin täydellinen desinfiointi (tällainen menettely suoritetaan ennen PCR-analyysin alkua infektioiden estämiseksi syntyneen nesteen kautta);
  • Suuri tietosisältö (tämä reaktio osoittaa viruksen läsnäolon lisäksi myös sen luonteen).

On tärkeää tietää! Hepatiitti C: n PCR-testin ainoa haittapuoli on henkilöstön ja laitteiden monimutkaisen koulutuksen tarve..

Korkealaatuinen PCR hepatiitti C: lle

Hepatiitti C: n korkealaatuisen PCR: n tulos on koko tutkimuksen perusindikaattori, koska sen ansiosta lääkäri voi määrittää patologian esiintymisen potilaalla. Mutta negatiivinen vastaus yllä olevaan reaktioon ei aina tarkoita täysin terveellistä kehoa. Loppujen lopuksi, jos RNA-solujen määrä putoaa alle sallitun tason, PCR-skannaus ei yksinkertaisesti huomaa niitä.

Analyysitulosten tulkinta

Laadullinen PCR-testi RNA: n läsnäololle hepatiitti C -soluista voi osoittaa vain kaksi mahdollista vastetta. Harkitse arvot, jotka osoittavat henkilön normaalin tilan ja meneillään olevan patologian.

Normi

Laadullisen polymeraasiketjureaktiotestin normaali indikaattori on negatiivinen testitulos. Se havaitaan viruksen ollessa nolla ja tunnistamattoman genotyypin puuttuessa. Mutta heidän turvallisuutensa varmistamiseksi potilaalle on parempi suorittaa useita lisätoimenpiteitä, jotka voivat paljastaa hepatiitti C -infektioon johtavia sairauksia.

Poikkeamat

Jos PCR-testi osoitti positiivisen vastauksen, tämä on selkeä merkki siitä, että testattavan henkilön kehossa on virusta. Kvantitatiivisesta arvosta riippuen (1,8x - 2,4x) lääkäri pystyy määrittämään sen kehitysvaiheen nykyisen vaiheen, mikä on ensimmäinen askel oikean hoitojakson laatimisessa. Genotyypin avulla voit myös havaita hepatiitin luokan jo ennen sen tyypillisiä ilmenemismuotoja (indikaattorit B1, B2 tai B3).

Vääriä positiivisia ja vääriä negatiivisia tuloksia

Itse PCR-testi ei ole melkein koskaan väärä. Mutta inhimillisen tekijän vaikutuksesta väärän diagnoosin todennäköisyys kasvaa merkittävästi. Siksi parhaan dekoodauksen saamiseksi on otettava huomioon seuraavat säännöt ennen polymeraasiketjureaktion suorittamista:

  1. Kaikkien tutkittujen biomateriaalien tulisi olla kohtuullisella etäisyydellä toisistaan ​​(kaikkien biokomponenttien yhdistelmä aiheuttaa aina väärän positiivisen tuloksen);
  2. Saadut nesteet on tarpeen varastoida ja kuljettaa analysoitaviksi erityisissä suojatuissa astioissa, joissa lämpötilaa tarkkaillaan (biologiset komponentit menettävät helposti helposti ominaisuutensa, mistä tulee myös väärän diagnoosin syy);
  3. Ennen työskentelyä biomateriaalien kanssa laboratoriotila on käsiteltävä hyvin, jotta roskat eivät pääse testinesteeseen;
  4. Vanhentuneiden reagenssien käyttö on ehdottomasti kielletty (tällainen huolimattomuus ei ole harvinaista nykyaikaisissa hoitolaitoksissa).

On tärkeää tietää! Saadun PCR-tuloksen oikeellisuus voi riippua myös potilaasta itsestään, jos hän ei noudata verinäytteiden valmistelun sääntöjä. Kunkin luetellun tilanteen tulos on analyysin toimittaminen uudelleen..

PCR-analyysin taajuus

Nykyaikainen lääketiede ei aseta rajoituksia hepatiitti C: n korkealaatuiselle PCR-analyysille. Mutta tällainen menettely suoritetaan jokaiselle potilasryhmälle tietty määrä kertoja. Nimittäin:

  • Ihmisille, joiden kehossa ei ole patologiaa - enintään 1-2 kertaa vuodessa;
  • Potilaille, joille hoidetaan hepatiitti C - 2 kertaa (ennen hoidon aloittamista ja lähempänä sen keskiosaa)
  • Raskaana oleville naisille - vähintään 1-2 kertaa kuukaudessa, tiineyden aikana (lisäksi testi suoritetaan enintään 2 kertaa vuodessa);
  • Muutaman viikon ikäisille vauvoille - vähintään 2 kertaa vuodessa.

Vaarattomuutensa vuoksi PCR-menetelmää käytetään usein jopa vastasyntyneillä vauvoilla, jota pidetään yhtenä sen merkittävistä eduista..

Kustannusten suhteen menetelmä polymeraasiketjureaktion suorittamiseksi eroaa huomattavasti tavanomaisista tutkimuksista. Tämän vuoksi joillakin ihmisillä ei ole varaa siihen. Mutta muiden kriteerien mukaan tällä testillä ei ole kilpailijoita, joten lääkärit suosittelevat sitä useimmiten..

Hepatiitti C: n (hepatiitti C RNA) PCR-analyysi

PCR-analyysi

Laadullinen analyysi osoittaa viruksen läsnäolon veressä. Tämä testi on välttämätön kaikille potilaille, joilla on vasta-aineita hepatiitti C: lle. Sen tulos voidaan "havaita" tai "ei havaita". Viitearvot (arvon, jonka pitäisi olla normaali) - "ei löydy". Havaittu tulos voi osoittaa, että virus lisääntyy ja tartuttaa uusia maksasoluja. Laadullisella PCR-testillä on tietty herkkyys (10-500 IU / ml). Tämä tarkoittaa sitä, että jos virusta on läsnä veressä hyvin pieninä pitoisuuksina (menetelmän herkkyysrajan alapuolella), voidaan saada "ei havaittu" -tulos. Siksi, kun suoritetaan korkealaatuista PCR-tutkimusta potilailla, joilla on matala viremia (viruskonsentraatio), esimerkiksi, kun heille suoritetaan viruslääke, on tärkeää tietää diagnostiikkajärjestelmän herkkyys. Virologisen vasteen hallitsemiseksi antiviraalisen hoidon aikana on toivottavaa käyttää diagnostista järjestelmää, jonka herkkyys on vähintään 50 IU / ml. Tällaiset kriteerit täyttyvät, esimerkiksi analysaattorit COBAS AMPLICOR HCV-TEST (analyyttinen herkkyys 50 IU / ml tai 100 kopiota / ml), RealBest HCV RNA (analyyttinen herkkyys 15 IU / ml tai 38 kopiota / ml) ja muut..

Mistä on turvallista ostaa uusia lääkkeitä hepatiitti C: lle? Mielestämme optimaalisin ja luotettavin tapa on käyttää foorumillamme todistettujen palveluntarjoajien palveluja, jotka ovat jo auttaneet satoja potilaita pääsemään eroon tästä taudista..

PCR-kustannukset

PCR-analyysi, jonka hinta riippuu käytetyistä reagensseista ja voi vaihdella 300 ruplaan. jopa 5000 ruplaa, suoritetaan päivästä viikkoon.

PCR-menetelmän lisäksi transkriptionaalisen monistamisen menetelmää (TMA) käytetään myös HCV RNA: n havaitsemiseen, jolla on parempi herkkyys (noin 5-10 IU / ml), mutta tämä menetelmä ei ole vielä levinnyt Venäjällä..

Kuinka usein minun pitäisi tehdä HCV PCR? Se suoritetaan yleensä välittömästi hepatiitti C -vasta-aineiden havaitsemisen jälkeen ja viruslääkehoidon 4., 12., 24. viikon jälkeen sekä 24 viikkoa AVT: n päättymisen jälkeen ja sitten vuosittain SVR: n tapauksessa.

Kuva: 1. Esimerkki hepatiitti C: n kvalitatiivisen PCR: n tuloksista.

Kvantitatiivinen PCR (viruskuormitus) -analyysi on testi viruksen (viremia) pitoisuudelle veressä. Viruskuormitus on tietyssä verimäärässä (yleensä 1 ml, joka vastaa 1 kuutiosenttimetriä) läsnä olevan geneettisen materiaalin (virus-RNA) yksiköiden määrä. Tämä määrä ilmaistaan ​​lukuina, yksikköinä IU / ml (kansainväliset yksiköt millilitrassa). Viruksen määrä voidaan näyttää eri tavoin. Esimerkiksi 1,5 miljoonaa IU / ml, mikä vastaa 1 500 000 IU / ml tai 1,5 * 106 IU / ml. Jotkut laboratoriot käyttävät muita mittayksiköitä - kopioita / ml. Muunnoskerroin kopioista kansainvälisiin yksiköihin on erilainen eri testausjärjestelmissä. Arvioitu arvo voidaan laskea uudelleen kaavan 1 mukaan IU / ml = 4 kopiota / ml, esimerkiksi 5,5 * 105 IU / ml = 2,2 * 106 kopiota / ml.

Mitä viruskuormitus vaikuttaa??

Ensinnäkin tarttuvuus. Mitä korkeampi viruksen pitoisuus on, sitä suurempi on riski tarttua virukseen esimerkiksi yhdynnän tai vertikaalisen tartunnan kautta. Toiseksi viruksen pitoisuus vaikuttaa hoidon tehokkuuteen (jos hoito suoritetaan interferonin perusteella). Joten matala viruksen määrä on suotuisa tekijä hoidon aikana, ja erittäin korkea on epäedullinen. Kvantitatiivisella PCR: llä on myös suuri merkitys interferonihoitoa suoritettaessa sen onnistumisen arvioimiseksi ja kurssin keston suunnittelemiseksi. Joten nopealla vasteella hoitoon ja matalalla viremialla ennen hoitoa hoitoaikoja voidaan lyhentää. Päinvastoin, viruksen pitoisuuden hitaalla laskulla AVT voidaan pidentää.

Mitkä kuormitukset katsotaan pieniksi ja mitkä suuriksi?

Suurena kuormituksena pidetään yli 800 * 103 tai 800 000 IU / ml, mikä on noin 300 * 104 tai 3 000 000 kopiota / ml. Yli 1 * 107 IU / ml: n kuormitusta pidetään erittäin suurena. Asiantuntijoiden keskuudessa ei kuitenkaan ole vielä yleistä mielipidettä arvoista, jotka erottavat korkean ja matalan viremian. Joten joissakin teoksissa tämän rajan katsotaan olevan 400 000 ME / ml..

Kuinka usein tehdä kvantitatiivinen testi?

Yleensä se tehdään ennen hoitoa ja 12. hoitoviikon jälkeen sen tehokkuuden arvioimiseksi, jos laadukas RNA-testi määritetään edelleen.

Kvantitatiivisen testin tulos voi olla viremian kvantitatiivinen arviointi edellä kuvatussa muodossa sekä tulokset "mittausalueen alapuolella" ja "ei havaittu".

Kvantitatiivisen PCR: n herkkyysraja on yleensä korkeampi kuin kvalitatiivisen PCR: n. Joten COBAS AMPLICOR -järjestelmässä se on 600 ME / ml. "Ei havaittu" -tulos voi osoittaa, että kvantitatiivinen testi ja vahvistava kvalitatiivinen testi eivät havainneet viruksen RNA: ta. Tulos "mittausalueen alapuolella" tarkoittaa, että kvantitatiivinen testi ei havainnut hepatiitti C -RNA: ta, mutta virusta on läsnä hyvin pieninä pitoisuuksina (jos tehtiin vielä uusi vahvistava kvalitatiivinen testi).

Kuva 2 Esimerkki kvantitatiivisista testituloksista.

Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle: tulosten tulkinta

RNA-virus pääsee maksasoluihin ja aiheuttaa taudin - hepatiitti C.Sairaus on akuutti ja krooninen. Sille on ominaista virtaus ilman näkyviä merkkejä. Tämä kurssi selitetään viruksen korkealla mutaatiokyvyllä ja eri lajien esiintymisellä. Tämä auttaa taudinaiheuttajaa sopeutumaan isäntään ja välttämään immuunijärjestelmää..

Tutkimus kehityksen alkuvaiheessa on tehotonta. Hepatiitti C: n kvalitatiivinen PCR-analyysi tehdään taudinaiheuttajan tunnistamiseksi ja hoidon aloittamiseksi ajoissa.

Mistä saan tietää? Artikkelin sisältö.

Mikä on laadullinen hepatiitti C -testi?

Hepatiitti C on vakava sairaus, jolla on krooninen kirroosi ja maksasyöpä. Tutkijat eivät ole pystyneet pitkään aikaan kehittämään rokotetta tautia vastaan ​​huolimatta HCV: n rakenteellisten ominaisuuksien tutkimisesta. Taudinaiheuttajien lajien vaihtelua on tutkittu huonosti.

Elinvauriot voidaan havaita vain laboratoriotestien avulla, ja muiden tartunta voidaan estää. Tätä tarkoitusta varten suoritetaan laadullinen PCR-testi hepatiitti C: lle..

Kantaja voi saada tartunnan monien vuosien ajan eikä olla tietoinen taudista. Laadulliseen analyysiin kuuluu potilaan veren polymeraasiketjureaktion suorittaminen laboratoriossa RNA-viruksen läsnäolon varalta. Diagnoosi suoritetaan ultraherkillä lääketieteellisillä laitteilla, jotka auttavat havaitsemaan ne.

Mitä kvalitatiivinen analyysi osoittaa?

Laadukkaalla PCR-tutkimuksella on etuja muihin menetelmiin verrattuna:

  • Tämä menetelmä auttaa tunnistamaan taudinaiheuttajan geneettisen materiaalin alkuvaiheessa;
  • näyttää taudinaiheuttajan tyypin;
  • testijärjestelmää käytetään, materiaalia ei tarvitse kylvää ravintoalustaan;
  • taudinaiheuttajan diagnoosi on nopea: analyysin tulos on valmis 5 tunnissa;
  • paljastaa piilotetun infektion.

Laadullinen analyysi määrätään rutiinitutkimuksen aikana, kun sen käytölle on viitteitä. Se suoritetaan hoidon aikana, toipumisen jälkeen. Sen avulla vahvistetaan hepatiitti C -viruksen vasta-aineiden esiintyminen tai puuttuminen veressä.

  • HCV-genotyypin kvantitatiivinen sisältö;
  • viruksen RNA: n kvalitatiiviset ominaisuudet;
  • genotyyppien määrittäminen.

Tarkista tulos uudelleen herkemmällä reagenssilla.

Indikaatiot tutkimukseen

Laadukkaan PCR: n suorittamiseksi vaaditaan edellytykset sen nimittämiselle:

  • yhdynnässä hepatiittiviruksen tartunnan saaneen henkilön kanssa;
  • maksakirroosi;
  • pakollinen tutkimus ennen leikkausta;
  • rokotus hepatiitti B -virusta vastaan;
  • hoitolaitosten, päiväkotien, koulujen työntekijöiden rutiinitarkastus.

Jos potilaalla on selkeitä hepatiitin merkkejä:

  • ihon keltaisuus, silmänvalkuainen;
  • kipu oikeassa hypochondriumissa;
  • väsymys;
  • maksan koon kasvu;
  • pahoinvointi.

Hepatiitti C -virus pääsee maksasoluihin verisuonten kautta. Taudinaiheuttaja voi päästä hemodialyysin kautta, tartunnan saaneen neulan, tatuoinnin, hammas- ja kosmeettisten toimistojen kautta.

Viruksen siirtyminen vastasyntyneelle tartunnan saaneelta äidiltä on mahdollista, jos vauvan iho loukkaantuu synnytyksen aikana. Laadullinen analyysi paljastaa viruksen ja osoittaa toissijaisia ​​merkkejä: vasta-aineiden läsnäolo potilaan veressä.

Tulosten dekoodaus

Hepatologi tai tartuntatautien asiantuntija selvittää hepatiitti C: n PCR- ja ELISA-tulokset. Saadut tiedot vahvistetaan kattavalla tutkimuksella:

  • biokemiallinen analyysi;
  • Elinten ultraääni;
  • maksabiopsia.

Saatujen tietojen perusteella lääkäri vahvistaa tai kieltää hepatiitti C: n.

PCR-testin vakioherkkyys vaihtelee välillä 10-500 IU / ml. Analyysi ei anna tulosta, jos se on määritetyn parametrin alapuolella.

Kvantitatiivinen PCR-analyysi osoittaa viruskuormituksen: taudinaiheuttajan pitoisuus ihmiskehossa (kuinka monta flavavirusfragmenttia on 1 ml: ssa verta). Tämä tutkimusmenetelmä on määrätty ennen monimutkaisen hoidon aloittamista ja taudin 12. viikolla. Hän auttaa:

  1. Määritä taudin aste. Jos viruksen pitoisuus potilaan veressä on korkea, infektion siirtäminen muille on mahdollista..
  2. Määritä antiviraalinen hoito, valitse haluamasi hoitomenetelmä.
  3. Tee ennuste palautumisesta.

On tärkeää määrittää genotyyppi, koska taudinaiheuttaja mutatoituu jatkuvasti ja sopeutuu kehoon. Tunnetaan 11 tyyppiä, kolme tunnistettiin Venäjän federaation alueella: 1, 2, 3. Tutkimus osoittaa virusinfektion tyypin.

Salauksen purkamisen yhteydessä he kirjoittavat:

  • RNA havaittu;
  • RNA: ta ei havaittu (tautia ei havaittu);
  • flavaviruksen tyyppi;
  • kvantitatiivinen koostumus (pitoisuus veressä);
  • testin nimi.

RNA havaittu

Jos hepatiitti C löytyy potilaan biologisesta materiaalista, lääkäri määrää toisen tutkimuksen virheen poissulkemiseksi. Biomateriaalin tutkimus tehdään 1–5 päivästä. Määräaika riippuu henkilöstön työmäärästä.

Flavaviruksen ja sen vasta-aineiden läsnäolo osoittaa taudin pitkittyneen kulun, joka on siirtynyt krooniseen vaiheeseen. Vääriä viitteitä esiintyy raskaana olevilla naisilla ja ihmisillä, joilla on muita tartuntatauteja.

RNA: ta ei havaittu

Laadullisessa analyysissä ei havaittu hepatiitti C. Negatiivinen arvo tarkoittaa, että veressä ei ole viruksen RNA: ta. Väsymys ja muut merkit voivat liittyä toiseen kehon infektioon ja vaatia lisätutkimuksia..

Mitä tehdä, jos havaitaan hepatiitti C -viruksen RNA?

Jos virus löytyy verestä, ei pidä epätoivoa ja paniikkia. 20 prosentissa tauti paranee itsestään. Vasta-aineet eivät aina tarkoita, että sinulla on hepatiitti C. On laboratoriovirheitä. Hyvän- ja pahanlaatuiset kasvaimet, elimistössä esiintyvät tarttuvat polttopisteet, edellinen rokotus levittävät PCR-kuvaa.

Varhainen havaitseminen auttaa pysäyttämään taudin ajoissa. Antiviraalinen hoito on määrätty. Lääkkeet auttavat parantamaan kroonisen sairauden 3-6 kuukauden kuluessa.

Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle, tulosten tulkinta

Hepatiitti B ja hepatiitti C: verikoe, kuten on osoitettu, tulosten tulkinta

HBsAg- ja HCV-verikoe: mikä se on, käyttöaiheet, dekoodaus

Kvantitatiivinen analyysi hepatiitti B: lle: indikaattoreiden ja niiden normien tulkinta

Hepatiitti C: n PCR-analyysi: missä ja miten se siirretään oikein, mikä tarkoittaa positiivista ja negatiivista tulosta

Hepatiitti C: n PCR on pakollinen analyysi tutkittaessa potilasta, jolla on maksavaurion oireita. Tutkimus on määrätty diagnoosin vahvistamiseksi ja kattavimpien tietojen saamiseksi taudin aiheuttajasta, virusinfektion aktiivisuudesta. Tulokset ovat pohjana antiviraalisen hoidon määrittelemiselle, sen keston määrittämiselle ja tehokkuuden arvioinnille..

Polymeraasiketjureaktiotekniikkaa käyttävä diagnoosi on yleistynyt suhteellisen äskettäin. Tätä aihetta on tutkittu 1970-luvun puolivälistä lähtien. Ensimmäiset julkaisut PCR: n käytön mahdollisuudesta käytännön lääketieteessä ilmestyivät vasta 1980-luvun puolivälissä..

  • PCR-tyypit
  • Testin käyttöaiheet
  • Minne viedä?
  • Verenluovutusta koskevat säännöt
  • Tulosten dekoodaus
  • Plussat PCR-diagnostiikasta
  • Kustannukset

Selitettäessä mitä PCR on, lääkärit korostavat, että tämä on luotettavin ja luotettavin hepatiitti C -analyysi. Tämä testi mahdollistaa paitsi viruksen RNA-hiukkasten tunnistamisen myös sen pitoisuuden (osoittaa tarttuvan prosessin aktiivisuuden) ja genotyypin. Saadut tulokset ovat avainasemassa jatkohoidon taktiikan ja suunnitelman määrittämisessä..

Mikä on reaktion järjestämisen ydin? Tiettyjen biologisesti aktiivisten aineiden avulla saavutetaan viruksen RNA-hiukkasten määrän kasvu pienessä määrässä verta. Myöhemmin genomin osat määritetään erilaisilla fysikaalis-kemiallisilla menetelmillä.

PCR suoritetaan käyttämällä useita komponentteja:

  • Pohjustus. Tämä on keinotekoisesti syntetisoitu yhdiste, jossa nukleotidisekvenssi on täysin identtinen viruksen RNA: n spesifisen alueen kanssa, jossa ei tapahdu mutaatioita ja muutoksia genotyypistä riippuen. Hepatiitti C -viruksen RNA: n määrittäminen suoritetaan käyttämällä tiukasti spesifistä aluketta.
  • RNA-polymeraasi. Entsyymi, jolle on tunnusomaista stabiilisuus ja rakenteellinen vakaus kemiallisen reaktion oikeaan kulkuun tarvittavien lämpötilamuutosten taustalla. Tarjoaa RNA-ketjun rakentamisen yhdessä PCR-vaiheista.
  • Proteiinisekoitus. RNA: n lisäosien rakentamiseksi tarvitaan "rakennusmateriaalia", jonka biologiseen näytteeseen lisätään tiettyjä proteiinirakenteen yhdisteitä.
  • Puskuri. Seos, joka ylläpitää optimaalisen pH-tason polymeraasiketjureaktion virtauksen varmistamiseksi.
  • Näyte biologisesta materiaalista, jonka epäillään sisältävän HCV (hepatiitti C -virus) RNA-näytteen.

Joissakin PCR-vaiheistamismenetelmissä käytetään lisäksi RNA-koettimia ja muita sisäisiä kontrolleja, joita käytetään kontrollinäytteinä tuloksia tunnistettaessa.

Aivan prosessia, jolla virus-RNA: n alueita lisätään matriisia käyttämällä, kutsutaan monistukseksi. Reaktio etenee useissa vaiheissa:

  1. Denaturoiva. RNA-säikeiden "purkaminen" saadaan aikaan nostamalla lämpötila tietylle tasolle.
  2. Hehkutus. Kun lämpötila on laskettu vaadittuihin arvoihin, alukkeet kiinnittyvät RNA: han. Tämä vaihe on mahdollinen vain, jos verinäytteessä on haluttuja viruspartikkeleita..
  3. Viruksen RNA-alueiden suora synteesi entsyymien osallistumisella.

Luetellut PCR-vaiheistussyklit toistetaan useita kymmeniä kertoja, mikä antaa hepatiitti C -patogeenin RNA-alueiden lukumäärälle moninkertaisen kasvun laboratoriomenetelmillä määritetyn tason.

Verinäyte valmistetaan asianmukaisesti ennen testausta. Sisältyvä RNA adsorboidaan kantajapuskuriin, pestään sitten pois ja käytetään polymeraasiketjureaktion aloittamiseen.

Tulokset havaitaan joko elektroforeesilla (vaaka- tai pystysuora) tai hybridisaatiolla. Menetelmä reaktion tulosten dekoodaamiseksi valitaan tutkimuksen tavoitteiden perusteella (yksinkertaisesti tunnistamalla RNA tai määrittämällä sen likimääräinen määrä).

PCR - tarkin verikoe hepatiitti C: lle

Ehdotettujen HCV-tutkimusten luettelo sisältää useita kohtia, jotka eroavat toisistaan ​​kustannusten, valmiusajan ja toteutustavan suhteen..

Jos viitataan Maailman terveysjärjestön (WHO) protokolliin, infektion diagnosointimenettely sisältää useita peräkkäisiä vaiheita..

Aluksi vuokraa:

  • veren ja virtsan yleinen analyysi;
  • veren biokemia;
  • tutkimus glukoosipitoisuudesta (ehdottomasti tyhjään vatsaan);
  • HIV-testi;
  • fluorografia;
  • immunogrammi (jos epäilet autoimmuunisairauksien esiintymistä).

Jos biokemiallisen verikokeen parametrit poikkeavat fysiologisesta normista, potilaalle määrätään testi, joka perustuu viruksen ja veren kosketuksessa tuotettujen spesifisten vasta-aineiden havaitsemiseen (ELISA)..

Mutta tällaisella veritutkimuksella hepatiitti C: lle on merkittävä haittapuoli. Vasta-ainesynteesin prosessi riippuu immunokompetenttien solujen toiminnasta ja tuotannosta. Kehon yksilölliset ominaisuudet voivat aiheuttaa sekä vääriä negatiivisia että vääriä positiivisia vastauksia..

Ennen ELISA-testin määräämistä lääkäri kertoo potilaalle mahdollisesta virheestä, joka herättää vastauskysymyksen: "Mikä verikoe osoittaa hepatiitti C: tä minimaalisella vaaralla saada virheellisiä tuloksia?" Diagnoosin vahvistamiseksi tai kumoamiseksi tarkin laboratoriotesti on reaaliaikainen PCR.

Muut toimintatavat riippuvat siitä, mitä tutkimus osoittaa. Jos diagnoosi on vahvistettu, potilaalle määrätään välittömästi hepatoprotektorit, varoitetaan oikean ravitsemuksen ja terveellisen elämäntavan tärkeydestä. Kohdennettu hoito on kuitenkin mahdotonta määrittelemättä viruskuormituksen tasoa ja hepatiitti C-genotyyppiä..

Jotkut lääkkeet voivat aiheuttaa hepatiitti B: n pahenemisen. Siksi komplikaatioiden poissulkemiseksi HBsAg-testit määrätään lisäksi. HCV: tä hoidetaan vasta negatiivisen testituloksen jälkeen.

Laji: kvalitatiivinen, kvantitatiivinen ja genotyypin määritys

Hepatiitti C: n alkudiagnoosissa tuotettujen vasta-aineiden tiitteri määritetään serologisella menetelmällä. Tämä tulos osoittaa karkeasti patologisen prosessin aktiivisuuden. Mutta lääkäri voi saada tarkimmat tiedot vasta tutkittuaan PCR-tiedot.

Tällä hetkellä analyysi suoritetaan melkein kaikissa laboratorioissa ultraherkällä menetelmällä. Siten HCV: n diagnoosi on mahdollista 10-14 päivän kuluessa infektion jälkeen, harvemmin - 2,5-3 viikon kuluttua. Tutkimuksen aikana tavoitelluista tavoitteista riippuen lääkäri määrää tietyn tyyppisen testin.

On olemassa seuraavia PCR-tyyppejä:

  1. Laadullinen. Diagnostisia testejä määrättäessä potilailla on kysymys siitä, mitä tämä tutkimusmenetelmä osoittaa. Laadullinen analyysi PCR-menetelmällä on erittäin herkkä testi, joka määrittää viruksen RNA: n läsnäolon veressä minimipitoisuudella. Tyypillisesti tällainen polymeraasiketjureaktio suoritetaan käänteiskopiointitekniikkaa käyttäen. Tämä on yksi harvoista PCR-menetelmistä, joissa RNA: ta voidaan käyttää kohteena.
  2. Määrällinen. Hepatiitti C -määrityksen avulla voit määrittää veressä olevan HCV-RNA: n tarkan tason. Tutkimus on mahdollista vain yhdellä tavalla - reaaliaikaisella menetelmällä. Valmistettaessa materiaalia PCR: ään näytteeseen lisätään väriainetta. Jokaisen monistussyklin jälkeen suoritetaan automatisoitu, reaaliaikainen kvantitatiivinen tutkimus. Tekniikka suoritetaan usein yhdessä käänteiskopioinnin kanssa. Siten on mahdollista määrittää kvalitatiivisesti viruksen RNA-kopioiden pieni määrä. On järkevää määrittää HCV-RNA-taso kvantitatiivisesti, jos saavutetaan positiivinen tulos kvalitatiivisesta PCR: stä..
  3. Genotyyppien määrittäminen. Analyysi suoritetaan diagnostisen prosessin viimeisessä vaiheessa. Tutkimuksen periaate perustuu eroon nukleotidisekvenssissä, joka erottaa hepatiitti C -viruksen yhden genotyypin toisesta. Yleensä analyysi tehdään multi-aluke (multiplex) PCR: llä.

Jos epäilet viruksen kantajaa, on suoritettava korkealaatuinen PCR. Jos tulos on negatiivinen, henkilö on todennäköisesti terve. Mutta infektion sulkemiseksi kokonaan pois, on suositeltavaa toistaa tutkimus 7-10 päivän kuluttua. Jos viruksen RNA havaitaan, suoritetaan lisätestejä (kvantitatiivinen ja genotyypin määritys).

Indikaatiot laboratoriotestille

Tärkein indikaatio veren luovuttamiseksi hepatiitti C: lle polymeraasiketjureaktiomenetelmällä on positiivinen entsyymi-immunomääritys (tyypistä riippumatta: Yhteensä, eriytetty testi IgG: lle ja IgM: lle).

Lisäksi sinun on tarkistettava:

  • raskauden aikana (testi tehdään kahdesti - ensimmäisen kolmanneksen aikana ja 7-10 viikkoa ennen syntymää);
  • työskenneltäessä lisääntyneen infektioriskin kanssa (sairaanhoitajat, laboratorioavustajat, luovuttajakeskusten työntekijät, kosmetologit jne.);
  • räikeällä yhdynnällä ja suojaamattomassa kosketuksessa tuntemattoman henkilön kanssa;
  • HIV: n, syövän, tiettyjen lääkkeiden jne. taustalla;
  • potilaat, jotka ovat riippuvaisia ​​suonensisäisistä lääkkeistä;
  • invasiivisten diagnostisten tai terapeuttisten toimenpiteiden jatkuvalla suorittamisella;
  • ennen vuotta 1992 suoritetulla verensiirrolla (aiemmin ei ollut luotettavia tapoja tarkistaa luovuttajan biologisen materiaalin viruksen esiintymistä).
  • kun avoin haava joutuu kosketuksiin jonkun toisen veren, steriloimattomien lääkinnällisten instrumenttien kanssa.

Ilmaantuvuus kasvaa vuosittain. Siksi infektion varhaisessa havaitsemiseksi suositellaan laboratoriotestejä HCV: lle kerran vuodessa..

Missä testata

Kun hän ottaa yhteyttä klinikkaan, potilaalla on oikeus ilmaisiin kokeisiin. Mutta ensin he suorittavat ELISA-testin. Ja vain positiivisella tai epäilyttävällä tuloksella esitetään PCR-tutkimus. Siksi kiireellinen diagnoosi voidaan tehdä ottamalla yhteyttä maksettuun laboratorioon, jossa voit lahjoittaa verta PCR: ään potilaalle sopivana ajankohtana. Samanaikaisesti on suositeltavaa tarkistaa välittömästi maksaentsyymien indikaattorit, standardit kliiniset veriparametrit.

Veritutkimus PCR: llä on pääsääntöisesti saatavilla miltei missä tahansa laboratoriossa. Jos veren keräyspisteessä ei ole asianmukaisia ​​laitteita, biologinen materiaali kuljetetaan tutkimusta varten lämpötilan ja muiden olosuhteiden mukaisesti. PCR klinikalla on mahdollista vasta muiden tutkimusten jälkeen, joiden tulokset osoittavat epäsuorasti hepatiitti C: n esiintymisen.

Kuinka luovuttaa verta oikein

Ennen kuin luovutat verta mahdollisen viruksen havaitsemiseksi, sinun on noudatettava useita sääntöjä analyysin valmistelemiseksi..

Tärkeimmät näkökohdat on mainittu muistiossa:

  1. Luopu 5-7 päivän ajan rasvaisten, paistettujen ruokien, alkoholin käytöstä. Yleensä lääkärit suosittelevat ruokavalion 5 ravitsemussääntöjen noudattamista.
  2. Älä syö 12-14 tuntia ennen tutkimusta. Voit juoda vain vettä.
  3. On parempi luovuttaa verta aamulla..
  4. Älä tupakoi ennen toimenpidettä.

Sinun tulisi myös varoittaa lääkäriä otetuista lääkkeistä, mahdollisista terveysongelmista, kroonisista sairauksista..

Veri otetaan verisuonesta. Menettelyn päätyttyä sairaanhoitaja tiivistää pistokohdan steriilillä laastilla, varoittaa tarpeesta taivuttaa käsivartta ja pitää sitä tässä asennossa 10-15 minuutin ajan. Muuten tuskallisen hematooman todennäköisyys on suuri..

Kuinka kauan tutkimus kestää?

Kuinka paljon analyysejä tehdään, riippuu laboratoriosta. Keskimääräinen läpimenoaika vaihtelee 1-3 päivän välillä. Jotkut klinikat tarjoavat maksullisen palvelun nopeaan PCR-testaukseen, mutta aikaa rajoittavat lääkinnällisten laitteiden ominaisuudet..

Klinikalla tulokset voidaan välittää lääkärille 7-10 päivän kuluessa. Tähän liittyy suuri potilasvirta. Samaan aikaan biologista materiaalia varastoidaan kaikkien vaatimusten mukaisesti.

Tulosten dekoodaus

Laadukkaan PCR: n dekoodaus ei pääsääntöisesti ole vaikeaa. Mutta väärinkäsitysten välttämiseksi sinun tulee ottaa yhteyttä lääkäriin laboratoriosta saadulla lomakkeella. Vaihtoehdot, mikä tarkoittaa tämän tyyppistä PCR: ää, on esitetty taulukossa.

Negatiivinen: henkilö on terve tai virus-RNA-pitoisuus veressä on liian pieni havaitsemiseksi.

Positiivinen: henkilö on saanut tartunnan

Suoritetaan, jos viruksen RNA havaitaan kvalitatiivisella tutkimusmenetelmällä.

Saatujen testitulosten mukaan viruksen kuormitustaso määritetään

Suoritettu hepatiitti C: lle, vahvistettu muilla tutkimusmenetelmillä.

Analyysin avulla voit määrittää patologian patogeenin tarkan genotyypin

Mutta usein syntyy tilanne, kun hepatiitti C: n ELISA on positiivinen ja PCR on negatiivinen. Vain lääkäri voi tulkita tällaiset testitulokset..

Tällaiset tiedot ovat kuitenkin mahdollisia seuraavissa tapauksissa:

  • raskaus;
  • siirretään akuutissa muodossa hepatiitti C;
  • HCV-hoito päättynyt;
  • infektioiden esiintyminen, jotka lisäävät väärän positiivisen ELISA-tuloksen todennäköisyyttä.

Vain polymeraasiketjureaktio osoittaa virusinfektion tarkan läsnäolon kehossa. Negatiivisen PCR: n taustalla positiivinen ELISA osoittaa useimmissa tapauksissa, että henkilö ei ole saanut tartunnan. Mutta lääkärin tulisi määrittää väärän positiivisen tuloksen tarkka syy..

Laadullinen analyysi

Hepatiitti C: n kvalitatiivinen PCR-analyysi vahvistaa taudinaiheuttajan läsnäolon veressä. Jos viruksen RNA: ta ei havaita, henkilö on terve. Mutta jos epäillään infektiota, on suositeltavaa suorittaa tutkimus uudelleen. Positiivinen tulos osoittaa infektion. Mutta tämä analyysi ei salli kroonisen hepatiitti C: n erottamista akuutista, eikä se voi osoittaa, kuinka aktiivinen patologinen prosessi on..

Kvantitatiivinen testi

Kvantitatiivinen analyysi PCR: llä suoritetaan diagnoosin vahvistamisen jälkeen ja sen dekoodaus on tärkeää hoitotaktiikan määrittämisessä. Hepatiitti C: n aiheuttajan hiukkasten pitoisuuksista riippuen erotetaan useita viruksen kuormitusasteita: keskitaso, korkea ja matala. Mitä korkeampi indikaattori, sitä vakavampi infektio on ja sitä vaikeampi hoito on. Normaalisti viruksen RNA: ta ei ole veressä.

Genotyyppien määrittäminen

Monet laboratoriot tekevät genotyypin määrällisen PCR: n yhteydessä, mikä säästää rahaa. Tällainen tutkimus tehdään vain kerran, ennen hoidon aloittamista. Yleensä analyysi suoritetaan yhdelle neljästä yleisimmistä genotyypeistä (1, 2, 3 tai 4). HCV-alatyyppi määritetään samaan aikaan. Hepatiitti C -alalajien 5 ja 6 genotyyppien määrittäminen ei ole mahdollista kaikissa laboratorioissa.

Plussat PCR-diagnostiikasta

Diagnoosi PCR-menetelmällä on yleistä seuraavista syistä:

  • korkea tarkkuus (edellyttäen, että käytetään uusimman sukupolven testausjärjestelmiä);
  • biomateriaalin näytteenoton helppous;
  • nopeita tuloksia (enintään 5 päivää).

Mutta tärkein etu on tutkimuksen laaja diagnostiikkakyky. Analyysin avulla ei voida vain tunnistaa virusta, vaan myös määrittää sen pitoisuus kehossa tarkasti ja määrittää infektion genotyyppi. Lisäksi tarvitaan kvantitatiivista tutkimusta antiviraalisen hoidon tehokkuuden arvioimiseksi. Hoidon päätavoitteena on saavuttaa testinopeus (ts. HCV-RNA: n havaitsematon taso) 4, 12 tai 24 viikkoa antiviraalisen kurssin aikana ja ylläpitää tämä tulos.

Kustannukset

PCR-analyysin hinta vaihtelee alueittain. Joten Moskovassa hinnat ovat korkeammat. Laadukas PCR maksaa 600-800 ruplaa, määrällinen - 2200-3000 ruplaa, genotyypin määritys - 1000 ruplaa. Voit selvittää, kuinka paljon tietty tutkimus maksaa suoraan laboratoriosta, lääketieteellisen organisaation verkkosivustolta tai puhelimitse.

Hepatiitti C: n kvalitatiivinen PCR-analyysi: ominaisuudet, tulosten tulkinta

Virushepatiitti C on yksi vakavimmista sairauksista, joita nykyaikainen ihminen voi kohdata. Ongelmana on, että tämä vakava sairaus on käytännössä oireeton ja henkilö voi tuntea olonsa normaaliksi, kun taas salakavala sairaus aiheuttaa korvaamatonta vahinkoa hänen maksaansa..

Vaarallisten seurausten välttämiseksi on tarpeen diagnosoida HCV ajoissa. Yksi parhaista diagnostisista menetelmistä on laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle. Tämä menetelmä diagnoosin tunnistamiseksi on informatiivisin ja täysin kivuton potilaille. Mutta kuinka testata hepatiitti C: n PCR-testi? Mikä tämä analyysi on? Kuinka hepatiitti C diagnosoidaan PCR: llä? Puhutaan tästä artikkelissa.

Hepatiitti C: n analyysi on laadullinen - mikä se on?

Tällä hetkellä on olemassa monia menetelmiä virussairauksien, mukaan lukien HCV, diagnosoimiseksi. Mutta PCR-verikoe hepatiitti C: lle - mikä se on? Ensinnäkin on sanottava, että tämä on tutkimus potilaan biologisista materiaaleista HCV-patogeenin havaitsemiseksi. Hepatiitti C: n PCR-verikoe suoritetaan laboratorio-olosuhteissa. Tätä tutkimusta vaaditaan ehdottomasti kaikille potilaille, joiden veressä on havaittu vasta-aineita hepatoviruksen antigeeneille. Hepatiitin PCR-diagnostiikan päätarkoitus on flavaviruksen havaitseminen.

Lyhenne PCR tarkoittaa "polymeraasiketjureaktio". Tämä tarkoittaa, että tämän hepatiitti C: n laadullisen analyysin avulla paljastuu maksaviruksen aiheuttama maksasolujen ja -kudosten suurin alue. Tämän analyyttisen menetelmän avulla voit määrittää keholle aiheutuneen vahingon määrällisen laajuuden sekä taudinaiheuttajan laadulliset ominaisuudet..

Laadulliset PCR-hepatiittitulokset voivat auttaa hepatologien hoidossa määrittämään HCV-hoito-ohjelman tietylle potilaalle. Tämän menetelmän ansiosta myös terapeuttisen kurssin kesto määritetään, koska sitä voidaan käyttää määrittämään kuinka vakava infektio on voitettava..

Kuinka testata hepatiitti C: n PCR?

Kun HCV diagnosoidaan, tehdään suuri määrä erilaisia ​​tutkimuksia sopivimman menetelmän löytämiseksi kyseisen taudin hoitamiseksi. Mutta kuinka tehdä PCR-testi hepatiitti C: lle?

Ennen kuin vastaat tähän kysymykseen, on selvennettävä, että tarkasteltavaa analyysityyppiä kutsutaan myös RNA-testiksi. Itse asiassa flavavirus sisältää RNA-partikkelin, jonka virionin mitat ovat 30-60 nm. Virus on altis mutaatioille, ja tämä otetaan aina huomioon tämän tyypin diagnosoinnissa. HCV-patogeenin kunkin genotyypin resistenssi eroaa merkittävästi, joten taudin kulun ennuste on hyvin riippuvainen tästä kvalitatiivisen hepatiitin analyysistä..

Mutta kuinka luovuttaa verta PCR: lle hepatiitti C: lle? Diagnoosissa sekä potilaan valmistelutoimet että itse verenluovutusmenettely ovat erittäin tärkeitä:

  • Päivän aikana ennen veren luovuttamista korkealaatuiseen hepatiitti-PCR-hoitoon potilaan tulisi luopua rasvaisista ruoista, alkoholista ja tupakoinnista. Muuten tulokset ovat epätarkkoja;
  • Illalla potilaan ei pidä syödä mitään verikokeen ottamista hepatiitista PCR: llä;
  • Biologiset materiaalit tulee luovuttaa aikaisin aamulla, ennen klo 8.00. On ehdottomasti kielletty syödä tai jopa juoda ennen tätä;
  • Potilaan verinäyte kerätään laskimosta kertakäyttöisellä steriilillä ruiskulla. Osana henkilökohtaista turvallisuutta potilasta kehotetaan varmistamaan, että toimenpide suoritetaan yksinomaan steriilillä ruiskulla..

Hepatiitti C PCR -analyysin läpäissyt potilas menee kotiin. Pieni veri otetaan laboratoriotesteihin, joten sen merkityksettömästä menetyksestä ei aiheudu negatiivisia vaikutuksia..

Tutkimustulosten dekoodaus

Hepatiitti C: n PCR-diagnostiikan dekoodaus suoritetaan laboratoriossa. Laboratoriotyöntekijät tekevät useita erityistutkimuksia, joiden tulos kirjataan kirjallisesti. Testin standardoitu herkkyys, jonka avulla on mahdollista selvittää taudinaiheuttajan läsnäolo ja jakautuminen, vaihtelee välillä 10-500 IU / ml.

Testitulokset dekoodataan samalla tavalla:

  • Positiivinen tulos osoittaa patogeenin suuren pitoisuuden isännän veressä. Tässä tapauksessa mitä korkeampi indikaattori, sitä vakavammin potilas on HCV: stä;
  • Negatiiviset testitulokset osoittavat erittäin alhaisen hepatoviruksen pitoisuuden ihmisen veressä. Jos hepatiitti C: n PCR: ää ei havaita, seuraavaa hoitoa varten tulisi määrittää potilaan biologisen materiaalin herkkyyden enimmäiskynnys erilaisille reagensseille.

Biomateriaalin tutkimuksen jälkeen lääketieteelliset laboratoriotyöntekijät antavat erityisen tuomion, joka on pakollinen dokumentoitu ja arkistoitu.

Mitä potilaan tulisi tehdä saatuaan testitulokset?

Saatuaan verinäytteiden tutkimuksen tulokset potilaan tulisi mennä hoitavan lääkärin luokse. Ei ole kategorisesti suositeltavaa tehdä itsenäisiä johtopäätöksiä diagnoosistasi ja suunnitella tietty hoito.

Testituloksista riippuen hepatologi määrää yhden tai toisen hoito-ohjelman aktiivisia viruslääkkeitä käyttäen. Analyyttisesti määritetystä HCV-genotyypistä riippuen voidaan määrätä seuraavat hoito-ohjelmat tälle vaaralliselle taudille:

  • Sofosbuviiri yhdessä Ledipasvirin kanssa genotyypeissä 1, 4, 5 ja 6;
  • Sofosbuvir ja Daklatasvir - kohdissa 1, 2, 3 ja 4;
  • Sofosbuviiri yhdessä Velpatasvirin kanssa - mille tahansa tunnetulle patogeenin genotyypille.

Kehon yleisestä kunnosta, hepatoviruksen pitoisuudesta ja vaurion ominaisuuksista riippuen hoitoa voidaan määrätä 12 tai 24 viikon ajaksi Ribaviriinin kanssa tai ilman. Potilaan tulisi ostaa lääkkeitä koko hoitojakson ajan, koska sitä ei pidä missään tapauksessa keskeyttää.

Ei kuitenkaan tarvitse säästää rahaa kalliille amerikkalaisille lääkkeille - voit ostaa halvempia intialaisia ​​analogeja. Nämä lääkkeet valmistetaan virallisen reseptin mukaan. Pienemmät kustannukset liittyvät mahdollisuuteen lääkkeen massatuotantoon. Samalla intialaiset valmistajat ovat niin varmoja tuotteidensa korkeasta laadusta, että tarjoavat asiakkailleen mahdolliset takuut. Esimerkiksi Zydus Heptiza tarjoaa palautustakuun. Tämä on asiakirja, jonka mukaan potilaalla on oikeus hoitoon uudelleen yrityksen kustannuksella, jos edellinen hoito ei auttanut.

Tärkeä! Lääkkeen ostamisen jälkeen potilaan on noudatettava täysin hoitavan lääkärin suosituksia ja käytettävä lääkettä päivittäin koko hoitojakson ajan..

Mistä saan laadullisen analyysin PCR: lle?

Joten, vastaus kysymykseen "Kuinka tehdä PCR-analyysi hepatiitti C: lle?" Tiedetään myös, mitä tehdä potilaalle asianmukaisen tutkimuksen jälkeen. Mutta on vielä yksi ongelma - missä on mahdollista lahjoittaa verta korkealaatuisen hepatiitti C: n PCR-analyysiä varten.

Maassamme voit kokea tämän tyyppisen diagnoosin:

  • Valtion poliklinikoissa;
  • Yksityisillä klinikoilla, joilla on yksinomainen palvelu;
  • Sairaaloissa ja sairaalassa;
  • Riippumattomissa lääketieteellisissä laboratorioissa.

Myös hepatiitti C: n PCR-verikoe voidaan tehdä ulkomaisissa klinikoissa ja laboratorioissa. Tämä tutkimusmenetelmä kuuluu standardiin.

Mitä muuta sinun pitäisi tietää korkealaatuisesta verikokeesta hepatiitti C: lle?

Jos hepatiitti C: n PCR-diagnostiikka on tarpeen, sinun tulisi tietää joitain tämän testausmuodon ominaisuuksia. Erityisesti:

  • Kyseisen verikokeen tulokset voivat olla positiivisia HCV: lle jo 4-5 päivää infektion jälkeen. Proteiiniyhdisteet muodostuvat myöhemmin;
  • Dekoodattaessa hepatiitti C: n kvalitatiivisen verikokeen tuloksia patogeenin genotyypin vieressä voi olla kirje. Esimerkiksi "1a". Tämä on alatyyppimerkintä, joka ei millään tavalla vaikuta hoidon ominaisuuksiin;
  • Testitulokset toimitetaan erittäin nopeasti. Seuraavana päivänä diagnoosin jälkeen potilas saa vastaavan asiakirjan;
  • Samanaikaisesti tämän testin kanssa veri otetaan ELISA-tutkimusta varten.

Hepatiitti C: n kvalitatiivisesta testistä on mielipide, että tämä potilaan veren testi ei ole paras tapa määrittää HCV-tyypin taso. Tämä mielipide on totta vain osittain, koska diagnoosin tulisi olla kattava..

Laadullinen analyysi hepatiitti C: lle: transkriptio

Virushepatiitti C: n kehittymisen syy on Flaviviridae-perheeseen kuuluvan patogeenin aiheuttama infektio. Infektion ja vasta-ainetuotannon alkamisen välillä havaitaan pitkä aikaväli, mikä ei salli taudin oikea-aikaista diagnosointia entsyymi-immunomäärityksen avulla.

Hepatiitti C: n PCR-analyysi, biokemia, CBC, maksatestit suoritetaan, jos epäillään infektiota. Polymeraasiketjureaktiolla on mahdollista havaita virus verestä jo infektion ensimmäisellä viikolla, mikä on menetelmän hallitseva etu.

Kvantitatiivinen ja kvalitatiivinen hepatiitti C -analyysi ja tutkimuksen ominaisuudet, miten valmistautua, onko virheitä, dekoodaus - harkitsemme yksityiskohtaisesti.

Mikä on polymeraasiketjureaktiomenetelmä?

Polymeraasiketjureaktio on molekyylitutkimusmenetelmä virusagentin geneettisen materiaalin määrittämiseksi tartunnan ensimmäisistä päivistä lähtien. Analyysille on ominaista korkea luotettavuus, spesifisyys ja tarkkuus. Hänen ansiostaan ​​viruksen puuttumisen / läsnäolon lisäksi havaitaan myös viruksen kuormitus (kvantitatiivinen arvo), genotyyppi.

Tutkimusta varten tarvitaan potilaan verta, jossa oletettavasti sijaitsee virusinfektion RNA. Laboratorio-olosuhteissa alukkeita lisätään biologiseen nesteeseen - nämä ovat keinotekoisesti syntetisoituja lyhyen pituisen halutun geenin fragmentteja. Plus RNA-polymeraasi - erikoistunut entsyymi, joka kertoo halutun materiaalin pitoisuuden.

Lisäksi veri, johon on lisätty komponentteja, kuumennetaan ja jäähdytetään useita kertoja erityisellä laitteella. Sen jälkeen tulee saatujen tulosten analyysi, vertailu virusagentin tunnettuihin geeneihin. Tämän perusteella tehdään johtopäätös taudista.

PCR-tutkimuksen lajikkeet

C-hepatiitti-PCR-analyysi suoritetaan laboratoriossa lisäämällä tarvittavia reagensseja, sillä on kolme lajiketta, joilla on erottuvat ominaisuudet:

  1. Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle on tutkimuksen ensimmäinen vaihe. Sen kautta patogeenin geneettinen materiaali havaitaan veriseerumissa.
  2. Kvantitatiivisen tutkimuksen avulla voit arvioida viruspitoisuuden - tämä on virtamateriaalin sisältö 1 ml: ssa potilaan verta. Se suoritetaan ennen hoidon aloittamista ja sitten 1-4-12 viikon hoidon jälkeen. Kun kurssi on pitkä, tutkimus on suoritettava 24 viikon hoidon jälkeen tehokkuuden arvioimiseksi.
  3. Genotyyppien määrittäminen. Tartuntatauti kehittyy nopeasti, viruksella on taipumus mutatoitua. Siksi on tarpeen tunnistaa viruksen genotyyppi.

Tutkijat ovat tunnistaneet 7 viruksen genotyyppiä. Venäjän federaatiossa 1-2-3 lajia ovat hyvin yleisiä.

Jokaiselle genotyypille on ominaista resistenssi hoidolle.

Esimerkiksi tyypin 1 hoidon tehokkuus on noin 60%, 2-3 tyypin taustalla indikaattori saavuttaa 85%.

Oikeiden lääkkeiden löytämiseksi, hoidon kesto, on tunnistettava infektion lisäksi myös viruksen pitoisuus, sen genotyyppi.

Käyttöaiheet

Hepatiitti-, PCR- ja ELISA-merkkiaineilla, muilla testeillä on tiettyjä lääketieteellisiä käyttöaiheita:

  • Kun potilaalla on ollut HIV-infektio, AIDS.
  • Yhteys tartunnan saaneen henkilön kanssa, koska virushepatiitti on erittäin tarttuvaa.
  • Maksakirroosin oireet - hepatomegalia, pernan koon kasvu, vatsaan ilmestyi laskimokuvio jne..
  • Toiminnallisten maksasairauksien klinikka - ajoittainen / jatkuva kipu oikeassa hypochondriumissa, ihon keltaisuus, pahoinvointi.
  • Korkeat ASAT- ja ALAT-arvot veren biokemiassa.
  • Raskauden aikana, kun maksan toimintakokeet ovat huonot.
  • Ennen viruslääkityksen aloittamista viruskuorman määrittämiseksi.
  • Hoidon tehokkuuden seuranta.
  • Hoidon jälkeen virusinfektioiden uusiutumisen estämiseksi.

PCR suoritetaan vahvistetulla hepatiitti B -diagnoosilla sekamuotoisen maksavaurion poissulkemiseksi.

Tutkimuksen valmistelu ja näytteenotto

Lääkäri kertoo kuinka valmistautua analyysiin. Valmistelua suositellaan potilaalle tarkan tuloksen saamiseksi. Se koostuu seuraavista suosituksista:

  1. Analyysi on tehtävä aamulla tyhjään vatsaan. Ennen veren ottamista saa juoda vain puhdasta, hiilihapotonta vettä. Viimeinen ateria - 8 tuntia ennen keruuta.
  2. Jos et saa testiä aamulla, voit tehdä sen illalla tai lounasaikaan, mikä tärkeintä - 5-6 tuntia syömisen jälkeen, ei aikaisemmin.
  3. Hylkää alkoholijuomat, kofeiinijuomat, mehut 48 tuntia ennen tutkimusta.
  4. 2 päivän ajan sinun on noudatettava ruokavaliota, lukuun ottamatta kaikkia haitallisia tuotteita. Jotkut lääkärit uskovat, että rasvaiset, paistetut elintarvikkeet eivät vaikuta PCR-testin tarkkuuteen..

Älä ota lääkkeitä 24 tuntia ennen toimenpidettä. Jos tämä ei ole mahdollista, kerro siitä lääkärillesi. Analyysiä ei suositella suoritettavaksi heti ultraäänen, TT: n, hieronnan ja muiden fysioterapiatoimenpiteiden jälkeen.

Verinäyte otetaan seuraavasti:

  • Potilaan käsivarteen kiristetyllä erityisellä kiristysnauhalla lääkäri pysäyttää laskimoverenkierron. Suonet tulevat näkyvämmiksi, mikä helpottaa neulan asettamista ja sitten veren ottamista.
  • Ihon alue ennen steriilin neulan asettamista käsitellään alkoholia sisältävällä nesteellä.
  • Neula työnnetään laskimoon, sitten siihen kiinnitetään koeputki, johon syötetään verta.
  • Neulan asettamisen jälkeen kiristysnauha poistetaan. Kerää tarvittava määrä verta, poista neula.
  • Alkoholiin kastettu vanupuikko asetetaan pistoskohtaan.

Mustelman muodostumisen estämiseksi neulan pistoskohdassa on tarpeen painaa vanupuikko riittävän kovasti loukkaantuneelle alueelle, taivuttaa käsivartta ja pitää sitä tässä asennossa 3-4 minuuttia.

Jos potilas ottaa veren ohentavia lääkkeitä (aspiriini, varfariini), verenvuodon pysäyttämisessä voi olla tiettyjä ongelmia.

PCR: n edut muihin testeihin verrattuna

Polymeraasiketjureaktiomenetelmällä on tiettyjä etuja muihin diagnostisiin tekniikoihin verrattuna..

Tutkimuksen edut on esitetty taulukossa:

Tutkimuksen tyyppiMahdollinen tulos ja aiottu transkriptio
Laadukas PCR
Määrällinen
Genotyyppien määrittäminen
Patologian aiheuttajan suora diagnoosiMuiden tutkimusten avulla voimme antaa vastauksen - onko kehossa taudinaiheuttajaa vai ei. Mutta käyttämällä PCR-tekniikoita, voit määrittää nimenomaan viruksen tekijän tyypin.
Tutkimuksen spesifisyysPCR havaitsee ainutlaatuisen palan DNA: ta, joka sopii vain yhteen virustyyppityyppiin. Tämä minimoi virheiden mahdollisuuden..
Suuri herkkyysasteJopa vähäinen viruskonsentraatio veressä voidaan havaita.
Kaikkien taudinaiheuttajien määrittäminenTutkimuksen aikana kaikki patogeenit voidaan havaita.
Piilevät infektiotViruspatogeenin lisäksi voidaan havaita infektioita, joilla on piilevä kulku, jotka erottuvat korkealla antigeenisella aktiivisuudella..

Kun potilas saa positiivisen tuloksen, se tarkoittaa, että hepatiitin aiheuttajan geneettinen materiaali on löydetty biologisesta nesteestä. Negatiivinen kokonaismäärä - ei viruksen jälkiä.

Tulosten dekoodaus

Lääkärin tulisi tulkita tulokset potilaan laboratoriossa saaman johtopäätöksen perusteella. Tiedot on analysoitava yhdessä biokemian, CBC: n, ultraäänen indikaattoreiden kanssa.

Laadullinen

Laadullinen tutkimus osoittaa virustaudin aiheuttajan esiintymisen tai puuttumisen ihmisen veressä. Vaihtoehtoja voi olla kaksi - negatiivinen (normi) tai positiivinen tulos.

Lomakkeessa sanotaan joskus: löytyi tai ei löydy.

Positiivinen tulos - laboratorion assistentti havaitsi virusagentin geneettisen materiaalin potilaan veressä, infektio vahvistettiin. Negatiivinen johtopäätös - infektiota ei ole, viruksen RNA-fragmentit ovat herkkyysrajojen alapuolella.

Määrällinen

Kvantitatiivinen analyysi edellyttää useita vaihtoehtoja tuloksille. Mukavuuden vuoksi esittelemme ne taulukon muodossa..

TulosDekoodaus
NegatiivinenTämä on normi terveelle ihmiselle. Tämä tarkoittaa, että tutkitussa biologisessa materiaalissa ei ole virushepatiitti-RNA: ta tai sisältö on alle herkkyysrajan.
Enintään 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlOsoittaa, että RNA-pitoisuus on pienempi kuin kvantifiointialue. Tulosta on tulkittava huolellisesti, koska sitä pidetään kiistanalaisena. Lisäksi suoritetaan muita tutkimuksia myöhempää vertailua varten. Toista myös PCR-testi.
Jopa 8 * 10 ^ 5 IU / mlAlhainen viruskuorma. Yleensä tämä tulos tarkoittaa, että hoito on tehokasta..
Alkaen 8 * 10 ^ 5 IU / mlSuuri viruskuorma. Hoito on tarpeen välittömästi (ellei sitä suoriteta) tai lääkityksen korjaaminen on tarpeen.
2,4 * 10 ^ 7 IU / mlRNA on suurempi kuin ylempi kvantifiointimaksimi. Tätä taustaa vasten viruskuormitusta ei arvioida. Toinen tutkimus, jossa laimennetaan biologista nestenäytettä, vaaditaan.

Genotyyppien määrittäminen

Tulos - spesifisen genotyypin ribonukleiinihappo löydettiin. Lisäksi ilmoitetaan genotyyppi ja alatyyppi, laboratorioassistentti koodaa johtopäätöksen latinalaisin kirjaimin ja numeroin. Esimerkiksi genotyyppi 1a. Yhteensä 7 genotyyppiä, 67 alatyyppiä erotetaan.

Tulos - havaittiin hepatiitti C -viruksen RNA - tämä on harvinaista genotyyppiä oleva DNA, jota ei voida liittää yleisiin virustaineisiin, joten tarvitaan lisädiagnostiikkaa.

Kun PCR on negatiivinen ja ELISA positiivinen

Selvittää laboratorioavustajan hepatologin tai tartuntatautien asiantuntijan johtopäätökset. On aina olemassa riski saada väärä negatiivinen tai väärä positiivinen tulos. Joskus tapahtuu, että PCR on negatiivinen ja ELISA on positiivinen.

Tämä tarkoittaa, että potilaan veressä ei tällä hetkellä ole virusta, mutta hänellä on ollut akuutti sairaus. Yleisesti uskotaan, että ELISA osoittaa vasta-aineita, joita immuunijärjestelmä tuottaa patogeenin tunkeutumisen jälkeen kehoon..

ELISA: lle on PCR: ään verrattuna ominaista alhainen luotettavuus ja luotettavuus, joten sitä käytetään ensisijaisena seulonnana. Virushepatiitin diagnosoinnissa polymeraasiketjureaktio on välttämätön.

Hepatiitti C -testauksen kustannukset

Voit tehdä testejä sairaalassa, jossa potilasta tarkkaillaan, jos siellä on laboratorio, tai voit mennä yksityiseen keskukseen maksullisesti.

Lyhyessä ajassa voit saada tuloksen laboratoriokeskuksissa, kuten Gemotest, Invitro, Helix.

Tutkimuskustannukset laboratoriosta riippuen:

Laboratorion nimiHintapolitiikka
Helix· Biologisen materiaalin näytteenottokustannukset - 170 ruplaa.

Laadullinen + kvantitatiivinen tutkimus PCR-menetelmällä - 3990 ruplaa.

Virustaudin vasta-aineiden havaitseminen - 1500 ruplaa (2-3 päivää).

Viruksen aktiivisuuden tarkistaminen ennen hoidon aloittamista - 4090 ruplaa.

InvitroHepatiitti C -viruksen RNA: n kvantitatiivinen havaitseminen PCR: llä - 3140 ruplaa.

Biologisen materiaalin (laskimoveri) kerääminen - 199 ruplaa.

Viruskuormituksen arviointi reaaliaikaisella tunnistuksella - 18000 ruplaa.

Laadukas ultraherkkä testi - 3000 ruplaa.

Genotyypin määritys - 1250 ruplaa.

HemotestMäärällinen tutkimushinta 2200 ruplaa.

Laadukas diagnostiikka 700 ruplaa.

Taudinaiheuttajan RNA: n määrittäminen - 4000 ruplaa.

Verinäyte laskimosta noin 150 ruplaa.

Tutkimuksen kesto on keskimäärin 2-3 päivää. Joissakin laboratorioissa on palvelu kiireellisenä analyysinä, sen kustannukset ovat 1,5-2 kertaa korkeammat. On myös mahdollista soittaa lääkäriin kotiin verta luovuttamaan, ja tulokset voidaan saada sähköpostitse tai henkilökohtaisesti laboratorioon ottaessasi yhteyttä..