Hepatiitti B -virustestit (ELISA ja PCR)

Hepatiitti B on tarttuva maksasairaus, joka tapahtuu autoimmuunimekanismilla. Veri, joka pääsee vereen, lisääntyy maksasoluissa aiheuttaen niiden kuoleman. Viipyvässä kroonisessa muodossa hepatiitti B aiheuttaa syöpää ja kirroosia. Oireiden suhteen tauti on samanlainen kuin vilustuminen, sitä on vaikea tunnistaa varhaisessa vaiheessa. Kun olet ottanut yhteyttä potilaaseen tai vierailen maissa, joissa esiintyy paljon esiintyvyyttä, mahdollisen infektion uhka, suoritetaan verikokeet. Hepatiitti B: n PCR-analyysi suurella tarkkuudella määrittää viruksen läsnäolon, taudinaiheuttajan aktiivisuuden asteen.

Laadullinen arviointi tunnistaa taudinaiheuttajan, kvantitatiivinen arviointi auttaa määrittämään viruksen määrän. Uudelleentarkastelu auttaa näkemään kliinisen kuvan taudin kulusta dynamiikassa.

Mistä saan tietää? Artikkelin sisältö.

Mikä on hepatiitti B: n PCR?

Polymeraasireaktiomenetelmän (PCR) kehitti Nobel-palkittu Mullis. Se perustuu patogeenin rakenteen kopiointiperiaatteeseen. Määrittää HBV-viruksen DNA: n ja sen pitoisuuden veressä. Sairastumisjakson aikana seerumissa on proteiiniantigeenia - osa taudinaiheuttajan kuorta. Hän tunnistaa kehon immuunijärjestelmän ja hyökkää sitä vastaan..

Antigeenien ja vasta-aineiden pitoisuuden perusteella veriseerumissa voidaan arvioida taudinaiheuttajan aktiivisuuden aste.

PCR antaa arvion HBV: stä näytteenoton aikana. Molekyylitutkimuksen aikana DNA-ketju katkaistaan ​​ensin; tätä varten lämpötila vahvistimessa ensin nousee, sitten laskee voimakkaasti. Halutun sekvenssin markkerit kiinnitetään DNA: han - koemateriaalista luodaan kopiot, ne määrittävät patogeenin pitoisuuden 1 ml: aa.

Indikaatiot tutkimukseen

Laadullinen PCR-analyysi tunnistaa taudinaiheuttajan. Tuloksia käytetään hepatiitin vaiheen arviointiin.

Tutkimus on käynnissä:

  • luovuttajan veren vastaanottajat;
  • hemodialyysipotilaat, joilla on munuaisten vajaatoiminta;
  • HIV-tartunnan saanut;
  • raskaana olevat naiset;
  • tartuntatautien osastojen lääketieteelliset työntekijät;
  • verta avustavat laboratorioavustajat;
  • potilaat, joilla on maksasairaus;
  • kaikki mahdollisesti tartunnan saaneet;
  • ihmiset, jotka ovat käyneet maissa, joissa esiintyvyys on suuri.
Kvantitatiivinen PCR suoritetaan:
  • jos HBV-taudinaiheuttaja on aiemmin tunnistettu, hoito suoritetaan;
  • positiivisten ELISA-testien jälkeen (entsyymiin liittyvä immunosorbenttimääritys);
  • hepatiitti B -viruksen aiheuttamiin maksasairauksiin.

Tutkimusta varten laskimoveri otetaan, tämä tehdään tyhjään vatsaan. Arvioinnin tarkkuus riippuu potilaan oikeasta valmistelusta ennen tutkimuksia.

PCR-tyypit

Kvantitatiiviset ja laadulliset menetelmät hepatiitti B: n diagnosoimiseksi ovat olennaisesti samat. Ne perustuvat DNA-viruksen ominaisuuksiin, sen kykyyn syntetisoida erityisiä proteiineja, joita ei ole läsnä ihmiskehossa. Polymeraasireaktiomenetelmä suurella todennäköisyydellä tunnistaa patogeenin, jolla on monimutkainen rakenne.

HBsAg: n, HBeAg: n pitoisuudesta riippuen arvioidaan taudin kehitysvaihe ja hoidon oikeellisuus. Akuutissa hepatiitissa niitä esiintyy veressä samanaikaisesti; HBeAg: n läsnä ollessa potilas on virusten kantaja, joka kykenee tartuttamaan muita. Lääkäri määrittää PCR-tekniikan potilaan historian perusteella.

Kvantitatiivinen PCR hepatiitti B: lle

Taudin aikana polymeraasiketjureaktio analysoidaan toistuvasti, virusten määrä veressä muuttuu jatkuvasti. Inkubointijakson jälkeen HBsAg-taso nousee. Sitten ilmestyy HBeAg - antigeeni, joka sijaitsee patogeenin ytimessä. Kun tämä antigeeni häviää, vasta-aineet ilmestyvät sen tilalle. Tämä osoittaa kehon taistelun taudinaiheuttajan kanssa. Menetelmä määrittää immuunijärjestelmän viruskuormituksen.

PCR: n kvantitatiivinen indikaattori paljastaa taudin kroonisen muodon vaaran. Transaminaasien määrä on määritetty, jolla virus on inaktiivinen muille. Rekisteröityneille potilaille tutkimus suoritetaan kolmen kuukauden välein. Viruskuormitus määrää taudin vakavuuden. Jos se ylittää sallitun kahdesti, potilaalle määrätään lisätutkimus, hoitotaktiikkaa muutetaan.

Laadukas PCR

Polymeraasireaktiomenetelmä on luotettavin taudinaiheuttajan tunnistamiseksi. Hepatiitti B: n korkealaatuinen PCR-testi suurella tarkkuudella vahvistaa HBV-viruksen aiheuttaman infektion. Hän vahvistaa tai kumoaa alustavan diagnoosin.

50%: ssa DNA: ta virus havaitaan vaiheessa, kunnes keho tuottaa vasta-aineita. Immuunijärjestelmä ei tunnista välittömästi vieraita proteiineja, ne havaitaan, kun lisääntyvä virus lähtee maksasoluista.

HBsAg: n ja HBeAg: n tuhoaminen elimistö tuhoaa samanaikaisesti hepatosyytit. Tämä johtaa vakaviin komplikaatioihin. Kun HBV: tä on veressä yli kahden kuukauden ajan, hepatiitti B muuttuu krooniseksi. Virusta on helpompi taistella kahden ensimmäisen viikon aikana.

Hepatiitti B: n PCR-tulosten dekoodaus

Henkilö on terve, jos taudinaiheuttajaa ei ole veressä tai HBsAg-pitoisuus on vähäinen ja HBeAg puuttuu kokonaan. Tulos tässä tapauksessa on negatiivinen. Ainoastaan ​​yksittäisissä tapauksissa, joiden tulos on negatiivinen, havaitaan sairaus, mikä osoittaa taudin tai sen pahanlaatuisen nopean kulun. Immuunijärjestelmän tuottamat vasta-aineet neutraloivat DNA-viruksen. Mutta tässä tapauksessa laaja maksavaurio on mahdollista..

Jos HBsAg-tulos on korkeampi kuin tavalliset indikaattorit ja HBeAg on, suoritetaan lisäksi hepatiitti B: n kvantitatiivinen analyysi selvittääkseen, kuinka paljon taudinaiheuttaja on aktivoitunut.

Mitä tehdä, jos hepatiitti B vahvistetaan PCR: llä?

On tärkeää suojella rakkaitaan:

  • säilytä henkilökohtaisia ​​hygieniatuotteita, jotka voivat vahingoittaa ihoa ja limakalvoja (hammasharja, partaveitsi, manikyyritarvikkeet) erikseen;
  • käytä yksittäistä pyyhettä;
  • eristää haavat.

On hyödyllistä noudattaa ruokavaliota, luopua huonoista tottumuksista. Kaikista lääkärin määräyksistä huolimatta virus pääsee eroon ikuisesti.

Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle, tulosten tulkinta

Hepatiitti C: n PCR-analyysi: RNA-viruksen kvalitatiivinen ja kvantitatiivinen analyysi

Hepatiitti B -testit: normit, tulokset ja niiden tulkinta

HBsAg- ja HCV-verikoe: mikä se on, käyttöaiheet, dekoodaus

Laadullinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle: tulosten tulkinta

Hepatiitti B: n PCR-tyypit ja tulosten tulkinta

Polymeraasiketjureaktio on eräänlainen verikoe, jonka avulla voit havaita hepatiitti B -viruksen tarkasti.Menetelmän piirre on, että se pystyy osoittamaan HBV: n alkuvaiheessa - kuukauden kuluessa tartunnasta, kun taas potilaan spesifinen antigeeni havaitaan vasta 2 kuukauden kuluttua... PCR voi havaita paitsi yleisen DNA-viruksen myös mutanttikannat, joita mikään muu analyysi ei salli sinun nähdä.

Dekoodattaessa hepatiitti B: n PCR: ää tuloksia verrataan standardiarvoihin. Tämän perusteella tehdään johtopäätöksiä taudin esiintymisestä (positiivinen tulos), viruksen pitoisuudesta (aktiivisuus) tai sairauden puuttumisesta (negatiivinen tulos). Tietojenkäsittely kestää 2 viikkoa.

Virushepatiitti B: n PCR-tyypit

Hepatiitti B: lle on määrätty 2 diagnostiikkatyyppiä. Korkealaatuinen PCR antaa mahdollisuuden sanoa 100% tarkkuudella, onko veressä HBV: tä vai ei. Kvantitatiivinen PCR osoittaa viruksen aktiivisuuden, eli kuinka monta HBV-DNA-fragmenttia on 1 ml: ssa verta.

Laadukas PCR ja sen tulkinta

Veritesti hepatiitti B: lle PCR: llä voi paljastaa vain DNA-fragmenttien läsnäolon. Sitä määrätään, kun potilas epäilee HBV-infektiota tai kun muut diagnostiset menetelmät, esimerkiksi serologiset testit, eivät anna selkeää vastausta. Tulosten tulkitseminen laadullisen analyysin yhteydessä on hyvin yksinkertaista:

  • negatiivinen tulos - ei virusta;
  • positiivinen tulos - virus havaittu.

Laadukkaan PCR: n tarkoituksena on vahvistaa tai kieltää hepatiitti B -viruksen esiintyminen sekä tarjota varhainen diagnoosi. Jos HBV havaitaan 1-2 viikon kuluessa tartunnasta, hoito on mahdollisimman tehokasta. Kun HBV kehittyy aktiivisesti vähintään 2 kuukautta, tauti muuttuu krooniseksi eikä sitä voida täysin parantaa.

Jos hepatiitin kvalitatiivinen PCR osoittaa viruksen läsnäolon, seuraava vaihe on suorittaa kvantitatiivinen diagnoosi.

Kvantitatiivinen PCR

Ei riitä, että tiedetään vain, että potilaalla on HBV, jotta voidaan määrätä tehokas hoito tai arvioida meneillään olevan hoidon tuloksia. Hepatiitti B -viruksen DNA: n arvo on tarpeen määrittää kvantitatiivisesti 1 ml: ssa verta, ts. Kehon viruskuormitus. Tämän tyyppinen PCR hepatiitti B: lle suoritetaan seuraavissa tapauksissa:

  1. Ennen hoidon määräämistä.
  2. Hoidon tehokkuuden arvioimiseksi.
  3. Viruksen resistenssin kehittymisen selvittäminen otetuille lääkkeille.
  4. Määritä vaihe, jossa tauti on.

Virus mitataan kansainvälisissä yksiköissä (IU / ml) tai DNA-kopioiden lukumääränä / ml, toisin sanoen DNA-fragmenttien lukumäärä ml: aa verta kohti. Kahden yksikön välinen suhde riippuu valitusta testijärjestelmästä ja vaihtelee välillä 2 - 7 kopiota / ml 1 IU / ml: ssa. Jos järjestelmää ei tunneta, uudelleenlaskennassa käytetään keskimääräistä arvoa:

1 IU / ml = 5 kopiota / ml

Jos kvantitatiivinen analyysi tehdään välittömästi, rajanormi taudin diagnosoimiseksi on 75 IU / ml. Jos tulos on suurempi kuin tämä indikaattori, HBV: n diagnoosi tehdään, alle - HBV: tä ei havaita.

Kvantitatiivisen PCR: n tulkinta

Hepatiitti B: ssä seuraavat viruksen määrä (viremia), kopiot / ml, ovat PCR-normit:

  • 10 ^ 5 kopiota / ml. Kun korkealla virusaktiivisuudella ALAT-tason nousu havaitaan useammin 2 kertaa kuuden kuukauden aikana, viruslääke määrätään välittömästi.

PCR-diagnostiikan tuloksia käytetään myös selvittämään, miten hepatiitti-DNA käyttäytyy kroonisuudessa, ts. Siirtyminen krooniseen muotoon akuutista.

  • HBV-DNA 2 x 10 ^ 6 kopiota / ml tarkoittaa, että taudin kroonisen muodon hankkiminen on väistämätöntä.

Tutkimuksen valmistelu

HBV: n läsnäolon määrittämiseksi PCR: llä otetaan verikoe laskimosta. Menettely suoritetaan aina tiukasti tyhjään vatsaan, ja on parasta päästä laboratorioon aamulla, kun luonnollinen lepoaika ruoasta on 8 tuntia. Jotta tutkimuksen tulokset olisivat oikeat, sinun on tiedettävä etukäteen, kuinka valmistautua oikein klinikamatkalle. Lisävaiheet ovat seuraavat:

  1. Vältä rasvaisia ​​ruokia, tupakointia, alkoholia ja urheilua 12 tuntia ennen toimenpidettä.
  2. Levätä 20 minuuttia välittömästi ennen veren luovuttamista.
  3. Ennen toimenpiteen aloittamista on välttämätöntä varoittaa sairaanhoitaja lääkkeistä..

Huomio! Jos diagnoosi tehdään alle 5-vuotiaalle lapselle, hänelle on annettava puoli tuntia ennen toimenpidettä 1 lasillinen kiehuvaa vettä 10 minuutin välein..

Yhteenvetona

Nykyään PCR-diagnostiikka hepatiitti B: n havaitsemiseksi on tarkin menetelmä. Menetelmän avulla voit nähdä taudin piilevät ja mutatoituneet muodot, tunnistaa taudin ensimmäisten viikkojen aikana tartunnan jälkeen ja vastaavasti suorittaa tehokas hoito. Tilanteesta riippuen suoritetaan kvalitatiivinen tai kvantitatiivinen PCR, jonka tarkoituksena on havaita HBV ja määrittää sen aktiivisuus. Testattavaksi sinun on otettava yhteyttä virologiin, tartuntatautien asiantuntijaan tai hepatologiin.

Hepatiitti B: n PCR

Virushepatiitti B on vakava ja vaarallinen sairaus. Tämän taudin vaara on komplikaatioissa, jotka seuraavat sen tärkeimpiä ilmenemismuotoja. Siksi on erittäin tärkeää olla aloittamatta tautia, ja oikea-aikainen diagnoosi auttaa saavuttamaan tämän..

Koska hepatiitti B leviää pääasiassa kontaminoituneen veren kautta, tärkein menetelmä tämän taudin diagnosoimiseksi on tämän biologisen nesteen analyysi. Erityisesti tämä on polymeraasiketjureaktio (PCR). Mutta miten PCR: ää käytetään hepatiitti B: hen? Mikä tämä analyysi on? Kuinka valmistautua oikein hepatiitin PCR-testiin? Löydät vastaukset artikkelista.

Mikä tämä analyysi on?

Polymeraasiketjureaktio on verikoe, jolla voidaan määrittää patogeenin DNA: n ja RNA: n määrä ja pitoisuus. PCR: n avulla voit diagnosoida taudin ajoissa ja tasoittaa taudin vakavien seurausten riskin. Pieni näyte potilaan laskimoverestä otetaan virushepatiitti B: n diagnosoimiseksi.

Hepatiitti B: n PCR: n päätehtävät ovat:

  • Viruksen maksavaurion diagnoosi sen varhaisessa vaiheessa;
  • Diagnoosin selventäminen, jos muiden testien tulokset ovat kiistanalaisia;
  • Viruksen kantajan havaitseminen;
  • Taudinaiheuttajan genotyypin ja näennäistyypin määrittäminen.

Tämän tyyppisen diagnostiikan etuna on korkea luotettavuus ja nopeat tulokset. Erota kvantitatiivinen ja kvalitatiivinen PCR-määritys. Tarkastellaan kutakin niistä tarkemmin.

Kvantitatiivinen PCR hepatiitti B: lle

Kvantitatiivinen PCR hepatiitti C: lle suoritetaan patogeenisen DNA: n määrän määrittämiseksi potilaan veriplasmassa. Määritetystä fragmentista tulee tässä tapauksessa viruksen rakenneproteiinin ainutlaatuinen DNA-sekvenssi.

Kvantitatiivista PCR: ää käytetään enemmän kuin vain diagnoosin tekemiseen. Hepatiitti B: n hoidossa tätä testiä voidaan käyttää viruskuormitushoidon tehokkuuden määrittämiseen. Jos se vähenee, hoitoa voidaan pitää onnistuneena..

Laadukkaan polymeraasiketjureaktion dekoodaus suoritetaan laboratorio-olosuhteissa erikoistuneiden terveydenhuollon työntekijöiden toimesta. Tärkeimmät analyysimittarit on esitetty alla:

  • 75 IU / ml - 108 IU / ml - positiivinen;
  • Alle 75 IU / ml - negatiivinen tulos, viruksen maksavaurion aiheuttajaa ei havaittu.

Jos testitulos on positiivinen, voimme puhua taudinaiheuttajan havaitsemisesta isännän kehossa sekä siihen liittyvästä viruksen kuormituksesta. Tässä tapauksessa potilaalle voidaan määrätä erityinen hoito. Tehokkain on hoito, jossa käytetään innovatiivisia viruslääkkeitä. HBV on kuitenkin tällä hetkellä tunnustettu vain osittain parantuvaksi..

Negatiivinen PCR osoittaa, ettei hepatiitti B -viruksen aiheuttajalla ole tartuntaa, mutta se ei kuitenkaan tarkoita, että henkilö on täysin terve. On suositeltavaa testata myös muun tyyppinen hepatiitti. Hepatovirustyyppi C on erityisen salakavala, joka useimmiten aiheuttaa taudin kroonisen muodon ilman voimakkaita oireita. Siksi on tärkeää diagnosoida tauti ajoissa..

Laadullinen PCR-analyysi

Hepatiitti B: n kvalitatiivinen PCR-analyysi on tarkoitettu patogeenin havaitsemiseen. Tämä on yksi tarkimmista menetelmistä hepatoviruksen diagnosoimiseksi. Potilaan laskimoverinäytteisiin perustuva polymeraasiketjureaktio suoritetaan reaaliajassa.

Indikaattori, joka on yli 75,0 IU / ml, osoittaa taudinaiheuttajan esiintymisen potilaan kehossa. Tämä voi olla sekä viruksen kantaja että vaarallisen taudin aktiivinen vaihe..

Milloin PCR on osoitettu??

Hepatiitti B: n PCR-menetelmä on suositeltavin tapa tarkistaa viruksen esiintyminen veressä. Polymeraasiketjureaktiotesti on suositeltavaa suorittaa seuraavissa tapauksissa:

  • Hepatiitin ilmeisten oireiden läsnä ollessa - pahoinvointi, oksentelu, kovakalvon ja ihon keltaisuus, maksakipu, ulosteiden värimuutokset ja virtsan tummuminen;
  • Laskimonsisäisen (injektio) lääkeriippuvuuden kanssa;
  • Suurilla ALAT- ja ASAT-indikaatioilla biokemiallisen verikokeen tuloksissa;
  • Kolestaasilla (sappiteiden pysähtyminen);
  • Raskaus tai leikkaus, valmistautuminen synnytykseen tai leikkaukseen;
  • Säännöllisin dialyysi- tai verensiirtomenettelyin;
  • Jos olet ollut yhdynnässä mahdollisesti tartunnan saaneen kumppanin kanssa.

Kvantitatiivinen tai kvalitatiivinen PCR-analyysi voidaan määrätä myös henkilöille, joilla on jo aiemmin ollut jokin hepatiittimuodoista. Siten potilaan tilaa seurataan, koska uusiutuminen on mahdollista..

Kuinka valmistautua?

Mikä tahansa virustaudin diagnoosi vaatii valmistelua, muuten tulokset ovat epätarkkoja. Ennen veren luovuttamista hepatiitti B: n määrälliseen PCR: ään potilaan tulee:

  • Kieltäydy raskaasta ja rasvattomasta ruoasta päivä ennen verinäytteeseen tulemista
  • Älä syö viimeisten 8 tunnin aikana ennen testin tekemistä;
  • Kieltäydy kuluttamasta alkoholia ja tupakkatuotteita vähintään päivää etukäteen;
  • Vältä stressiä ja fyysistä ylikuormitusta, nuku hyvät yöunet.

Näytteet kerätään biologisesta nesteestä tutkimusta varten aamulla. Useimmiten hepatiitti B: n PCR-analyysi annetaan klo 8.

Hepatiitti B: n PCR-analyysi

Hepadnaviridae-perheen DNA: ta sisältävä virus on hepatiitti B: n suora aiheuttaja. Hepatiitti B: n PCR-analyysi antaa mahdollisuuden määrittää DNA-viruksen läsnäolo potilaan veressä. Positiivinen HBV-DNA-testi osoittaa infektion esiintymisen potilaan veressä. On huomattava, että diagnoosi PCR-analyysin avulla mahdollistaa paitsi infektion läsnäolon, myös sen määrällisen kuormituksen ja aktiivisuuden määrittämisen. Tämä menetelmä on luotettava, tarkka ja toistettavissa. HBV-DNA: n kvantifiointia qPCR: llä voidaan käyttää HBV-hoidon tehokkuuden seurantaan ja olla hyödyllistä ymmärtämään HBV: n luonnehistoriaa.

Hepatiitti B -infektio tapahtuu kotitalouden tai seksuaalisen kanssakäymisen kautta tai suorassa kosketuksessa saastuneen veren kanssa. Infektion jälkeen virus pääsee maksasoluihin, joissa se jatkaa aktiivista lisääntymistään. Verenkierron kautta patogeeniset solut leviävät koko kehoon. On huomattava, että hepatiitti B -virus on erittäin vastustuskykyinen hapolle ja korkeille lämpötiloille. Se pystyy säilyttämään vahingolliset ominaisuudet kuuden kuukauden ajan..

Hepatiitti B: n PCR-tyypit

Tähän mennessä on määrätty kahden tyyppisiä diagnooseja, jos epäilet hepatiitti B -viruksen esiintymistä: kvalitatiivinen PCR (voit määrittää sadan prosentin tarkkuudella viruksen läsnäolon veressä) ja kvantitatiivinen PCR (voit määrittää viruksen aktiivisuuden asteen).

  • Hepatiitti B: n PCR-tyypit
  • Dekoodataan kvantitatiivinen analyysi
  • Tutkimuksen valmistelu
  • Yhteenvetona

Korkealaatuista PCR: ää määrätään, jos epäillään HBV-infektiota tai jos muut diagnostiset menetelmät eivät ole tuottaneet selkeää tulosta. Tämän tyyppinen PCR-analyysi on äärimmäisen helppo tulkita: negatiivinen (veressä ei havaittu virusta), positiivinen (veressä havaittiin virus). Laadullisen analyysin päätehtävä on määrittää tartunnan saaneiden solujen läsnäolo taudin alkuvaiheessa. Jos virus diagnosoitiin kaksi viikkoa epäillyn infektion jälkeen, hoidon tehokkuus on suuruusluokkaa suurempi. Jos virus on veressä noin kahden kuukauden ajan, tauti muuttuu krooniseksi, joten sitä ei voida täysin parantaa..

Jos kvalitatiivinen diagnoosi on vahvistanut HBV: n läsnäolon veressä, lääkäri määrää määrällisen analyysin.

Kvantitatiivisen analyysin avulla voit määrittää viruksen kehityksen aktiivisuuden potilaan kehossa. Tämän tyyppinen PCR-analyysi määritetään:

  • taudin vaiheen määrittämiseksi;
  • seurata käytetyn hoidon tehokkuutta;
  • määrittää viruksen resistenssin taso tietylle lääkkeelle;
  • lääkkeiden valintaa varten.

Veren viruksen kvantitatiiviset indikaattorit mitataan yksikköinä yksikössä millilitraa tai DNA millilitrassa.

Jos lääkäri määrää välittömästi määrällisen diagnoosin tarkistamatta kvalitatiivista diagnoosia, 75 IU / millilitra katsotaan normiksi. Jos löydetään vähemmän kansainvälisiä yksiköitä, HBV: tä ei havaita, kun arvot ovat normin yläpuolella, diagnosoidaan virushepatiitti B.

Dekoodataan kvantitatiivinen analyysi

Seuraavia indikaattoreita (kopioina / millilitrana) pidetään OCP: n normina hepatiitti B: ssä: alle 10 3 - virus ei ole aktiivinen; 10 4 - 10 5 - virus on yleensä passiivinen; 106 - aktiivinen virus; 10 7 - virus aktiivisessa vaiheessa.

Kvantitatiivisten indikaattoreiden perusteella on mahdollista määrittää ehdottoman tarkasti taudin muoto (kuljetus, akuutti tai krooninen), viruksen vaste hoitoon, lisädiagnostiikan tarve.

Krooninen hepatiitti B todetaan, kun viruksen aktiivisuus on 105 kopiota millilitrassa. Kuljetus diagnosoidaan, jos kvantitatiiviset indikaattorit ovat alle 105 kopiota millilitrassa.

Hoidon aikana on tarpeen käydä säännöllisesti (kerran kolmessa kuukaudessa) toistuvalla kvantitatiivisella diagnostiikalla, jotta voidaan määrittää ajoissa hetki, jolloin virus saa immuniteetin käytettyihin lääkkeisiin ja muuttaa menetelmää. Jos kaikki tutkimukset suoritetaan oikein ja valitaan tehokas hoito, uudelleenanalyysi (kolmen päivän hoidon jälkeen) osoittaa patogeenisten solujen aktiivisuuden vähenemisen vähintään kahdeksankymmentäviisi prosenttia.

Maksabiopsia suoritetaan, kun kuuden kuukauden hoidon jälkeen ALAT-arvot ovat kaksi kertaa normaaliarvoa korkeammat, ja PCR-diagnostiikka osoittaa arvot alle 105 kopiota millilitraa verta kohti.

Tutkimuksen valmistelu

Analyysi vaatii laskimoveren. Saadaksesi tarkimmat tulokset, sinun on valmistauduttava toimenpiteeseen: kieltäydy ottamasta ruokaa vähintään kahdeksan tuntia ennen verinäytteen ottamista; luopua huumeiden hoidosta kahdessa päivässä (on pakollista varoittaa lääkäriä lääkkeiden ottamisesta); ennen veren luovuttamista sinun on vietettävä 20 minuuttia lepotilassa; Luopu urheilusta, alkoholista, tupakoinnista ja rasvaisista ruoista 12 tuntia ennen toimenpidettä.

Tärkeää: jos diagnoosi on tarpeen alle viiden kuukauden ikäiselle lapselle, hänen on annettava ruokalusikallinen kiehuvaa vettä joka kymmenes minuutti 60 minuuttia ennen verinäytteenottomenettelyä.

Yhteenvetona

Hepatiitti B: n PCR-analyysi on nykyään tarkin menetelmä viruksen diagnosoimiseksi. Menetelmän avulla voit tunnistaa taudin mutatoidut ja piilevät muodot, diagnosoida taudin infektion ensimmäisinä päivinä ja valita siten tehokkain hoito. Laboratorioavustaja vertaa analyysin tuloksia normiin ja lisää ne sitten johtopäätökseen. Tiedot käsitellään muutamassa päivässä. Saadaksesi lähetyksen PCR-analyysiin, sinun on otettava yhteyttä hepatologiin, tartuntatautien asiantuntijaan tai virologiin. On tärkeää muistaa, että mitä nopeammin pääset lääkäriin, sitä nopeammin tulokset saadaan, joten sitä tehokkaampi hoito on..

Lisää tuoreita ja merkityksellisiä terveystietoja Telegram-kanavallamme. Tilaa: https://t.me/foodandhealthru

Erikoisuus: tartuntatautien erikoislääkäri, gastroenterologi, pulmonologi.

Kokemus: 35 vuotta.

Koulutus: 1975-1982, 1MMI, san-keikka, ylempi pätevyys, tartuntatautilääkäri.

Tieteellinen tutkinto: korkeimman luokan lääkäri, lääketieteiden kandidaatti.

Koulutus:

  1. Tarttuvat taudit.
  2. Loisetaudit.
  3. Hätätilanteet.
  4. HIV.

Hepatiitin PCR-diagnostiikka: miten tulkita, taulukko

Hepatiitin PCR-analyysi - mikä se on ja miksi se tehdään

PCR-analyysin ydin on, että osa tutkittavasta geenistä pakotetaan lisääntymään koeputkessa käyttämällä erityisiä entsyymejä ja olosuhteita. Hepatiittivirusten PCR-analyysi antaa sinun määrittää viruskanta, jota ilman on mahdotonta suorittaa tehokasta hoitoa: kukin genotyyppi on eri herkkyys viruslääkkeille.

Käytetään kahta PCR-tyyppiä:

  • laadullinen;
  • määrällinen.

Antiviraalinen hoito tarvitsee jatkuvaa seurantaa hoidon oikeaan säätämiseen; näihin tarkoituksiin käytetään myös polymeraasiketjureaktiota.

Laadullinen ja kvantitatiivinen PCR

Hepatiitin laadullinen PCR antaa vastauksen: onko potilaan veressä viruskantaa ja mikä. Genotyypin määritys on tarpeen diagnoosin, taudin ennusteen selventämiseksi ja hoidon ajoituksen määrittämiseksi.

Kun viruksen läsnäolo on varmistettu, suoritetaan kvantitatiivinen PCR hepatiitille, jonka avulla lasketaan RNA-molekyylien määrä potilaan laboratorionäytteessä.

Valmistelu hepatiitin PCR-analyysiin

Polymeraasireaktiomenetelmällä tehtävään analyysiin tarvitaan laskimoverta. Tämä on tehtävä aamulla tyhjään vatsaan..

Potilaan tulee valmistautua tutkimukseen asianmukaisesti:

  • 10 tuntia kieltäytyäksesi ruoasta, voit juoda vain puhdasta vettä.
  • Lopeta alkoholin käyttö edellisenä päivänä, älä tupakoi 4 tuntia.
  • Fyysistä ja henkistä stressiä tulisi välttää ennen tutkimusta..
  • Jos tämä ei ole mahdollista, huumeiden käytön lopettamiseksi 2 päivän ajan, sinun on varoitettava laboranttia. Jotkut lääkkeet vaikuttavat lopputulokseen.

Hepatiitti C: n PCR-analyysi

Jos hepatiitti C: n PCR-testi antaa positiivisen tuloksen, se osoittaa, että patogeeninen mikro-organismi jakaa ja tartuttaa jatkuvasti maksasoluja.

Seuraava hepatiitti C: n kvantitatiivinen PCR mitataan kansainvälisissä yksiköissä / 1 ml tai IU / ml, mikä tarkoittaa, kuinka monta kopiota tietyn C-viruskannan ribonukleiinihaposta löytyy 1 ml: sta testiverta.

Seuraavassa taulukossa esitetään hepatiitti C: n kvantitatiivisen tutkimuksen dekoodaus PCR-menetelmällä:

Viruskuormitus, kopioita / mlKuormituksen arviointiTaudinaiheuttajan replikaation luonne
103 ja vähemmänErittäin matalaEpäaktiivinen
104 - 105MatalaUsein ei-aktiivinen
106KohtalainenAktiivinen
107IsoErittäin aktiivinen
  1. Alhainen viruskuormitus on merkki siitä, että terapeuttinen hoito on valittu oikein, ja ennuste paranemista hepatiitti C: lle on suotuisa.
  2. Suuri virussolujen pitoisuus osoittaa, että tauti on akuutissa vaiheessa. Potilaan veri on vaarallinen infektiolähde.
  3. Viruskuormitus, jonka indikaattorit ovat keskimääräisellä tasolla, luonnehtii joko HVS: n kroonista vaihetta tai sillä voi olla kaksi kehityssuuntaa: kohti sen kasvua tai laskua.

Kvantitatiivinen PCR-analyysi hepatiitti C: lle suoritetaan koko viruslääkityksen ajan: 4, 12 ja 24 viikon kuluttua, jonka tarkoituksena on vähentää viruksen määrää.

Lopussa - 6 kuukauden kuluttua tehdään PCR-kontrolli.

Hepatiitti B: n PCR-analyysi

Hepatiitti B (B): n PCR-analyysi suoritetaan infektion (HBV DNA) havaitsemiseksi.

HBV-DNA-pitoisuus mitataan kopioina / ml tai me / ml. Tutkimuksen tuloksia arvioitaessa ne ohjaavat seuraavia indikaattoreita:

  • 2x10 ^ 6 - 95 prosentissa tapauksista tulee krooninen.

Dekoodaa hepatiitin PCR-analyysi

Laadullisella PCR-analyysillä on kaksi vastausta:

  1. negatiivinen;
  2. positiivinen.

PCR-negatiivinen tarkoittaa, ettei verinäytteistä löydetty patogeenia.

Tuloksen luotettavuuden todennäköisyys on 95%. Loput 5% on inhimillinen virhe. Tämä mahdollisuus on sallittu tutkimuksen korkeiden vaatimusten vuoksi:

  • reagenssien varastointisäännöt;
  • lääketieteellisen henkilöstön asianmukainen pätevyys
  • biomateriaalin puhtaus.

Itse PCR-sarjalla on 100%: n diagnostinen tarkkuus.

Kvantitatiivinen PCR hepatiitille antaa sinun määrittää potilaan kehon viruskuormitus. Hänen avustaan:

  • taudin vaihe on määritelty (akuutti, krooninen);
  • viruslääkehoidon tehokkuus määritetään;
  • maksabiopsian tarve määritetään.

Joissakin tapauksissa potilas ei tunne mitään taudin merkkejä, kun taas PCR-menetelmä on saanut tartunnan. Tämä tarkoittaa, että tauti on alkuvaiheessa tai kroonisessa muodossa. Diagnoosin selventämiseksi tarvitaan lisätutkimuksia, jotta viruslääkkeet voidaan aloittaa varhaisessa vaiheessa.

PCR-diagnostiikan kustannukset

Valtion klinikat tekevät verikokeen PCR: lle ilmaiseksi, jos tartuntatautien erikoislääkäri tai hepatologi lähettää lähetyksen.

PCR-diagnostiikan maksullisia palveluja tarjotaan kaikissa Venäjän suurimmissa kaupungeissa. Kustannukset riippuvat testityypistä, käytettävissä olevista laitteista, ajoituksesta ja muista tekijöistä.

  • Korkealaatuinen PCR-analyysi Moskovassa ja Pietarissa maksaa 600-900 ruplaa. Alueilla - 300-800 ruplaa.
  • Hepatiitti C: n viruspitoisuuden määrittäminen maksaa 17 000 - 22 000 ruplaa. Hepatiitti B (B) -määrän kvantitatiivisen tutkimuksen hinta: 1200-10000 ruplaa.

PCR-menetelmän edut ja haitat

Mitkä ovat polymeraasiketjureaktiomenetelmän edut muihin diagnostisiin menetelmiin verrattuna?

  1. Laaja valikoima sovelluksia. PCR: llä, vakiovarusteena, voit tunnistaa minkä tahansa viruksen.
  2. Taudinaiheuttajan määrittämisen tarkkuus. Käyttämällä erilaisia ​​entsyymien ja määritystekniikoiden yhdistelmiä saavutetaan 100% testispesifikaatio osoitetulle infektiolle.
  3. Yliherkkyys. Tekniikan avulla voit havaita yhden viruksen molekyylin läsnäolon veressä.
  4. Tehokkuus. Laadullinen analyysi on valmis muutamassa tunnissa, kvantitatiivinen analyysi kahdessa päivässä.
  5. Viruksen diagnoosi inkubointijakson aikana. PCR: n avulla taudinaiheuttaja ei määritetä vasta-aineiden läsnäololla, kun kehon immuunivaste on jo olemassa, mutta ennen hoidon helpottavaa patologista prosessia..

PCR-analyysin haitat ovat seurausta sen eduista:

  • analyysin puhtauden kannalta vaaditaan korkeinta puhtausastetta, mukaan lukien laboratoriossa oleva ilma, jotta "vieras" DNA ei pääse tutkittavaan näytteeseen;
  • korkeat vaatimukset biomateriaalin näytteenoton ja analysoinnin suorittavalle henkilöstölle.

Saavutettujen tulosten arvioinnin tekee hoitava lääkäri, joka osaa erottaa todellisen analyysin väärästä positiivisesta (kun hoito on jo saatu päätökseen, mutta elinkelvoton virus pysyy veressä) ja väärän negatiivisen (kun virusta ei havaita kliinisessä kuvassa).

Hepatiitti B -analyysi: PCR-testi

Lääketieteen edistyminen on hämmästyttävää - monen tyyppisiä diagnooseja ei ollut saatavilla edes puoli vuosisataa sitten. Nyt heidän ansiostaan ​​jopa piilevät sairaudet voidaan määrittää - esimerkiksi piilevän kurssin PCR-analyysi hepatiitti B: lle. Itse asiassa patologian varhainen havaitseminen on helpompaa käsitellä sitä.

Menetelmän olemus

Itse polymeraasiketjureaktio on eräänlainen kopio tietystä DNA-osasta käyttämällä joukkoa spesifisiä entsyymejä. Jos esitetyssä biologisen materiaalin näytteessä - yleensä se on ihmisen veri, hepatiitti B -viruspartikkeleita on jäämiä, ne voidaan havaita laboratorio-olosuhteissa - tutkijoiden kehittämällä PCR-diagnostisella menetelmällä.

Voit nähdä reaktion käyttämällä vakiosarjaa:

  • matriisi-DNA - jossa on kopioalue;
  • DNA-alueet, jotka ovat rakenteeltaan samanlaisia ​​- alukkeet;
  • entsyymi, joka kykenee aktivoimaan reaktion, - polymeraasi;
  • laboratorioreaktioliuos.

Hepatiitti B -tutkimuksesta on kehitetty kaksi muunnosta - paitsi kvalitatiivinen, myös kvantitatiivinen. Tämä lisää tuloksen luotettavuutta - voit tunnistaa tarttuvan aineen mutanttikannat. Siksi PCR-menetelmä tunnustetaan useimmissa maailman maissa diagnostiikan "kultastandardiksi". Sen avulla lääkärit voivat tehdä yksiselitteisen johtopäätöksen - henkilöllä on virustauti hepatiitti B, jopa sen piilevällä kululla, tai hän on täysin terve.

Laadullinen PCR-muunnos

Tutkimuksen päätavoitteena on määrittää hepatiitti B -viruspartikkeleiden läsnäolo tai puuttuminen biologisen materiaalin näytteestä.Laadukkaita PCR-tutkimuksia suositellaan ihmisille seuraavista käyttöaiheista:

  • epäilty hepatiitti B -infektio;
  • taudin alkuvaihe - ennen tartunnan saaneen ihmisen organismin immuunivasteen muodostumista;
  • muiden diagnoosimenetelmien epäilyttävä tulos - esimerkiksi serologinen verikoke.

Tällaisen diagnostisen toimenpiteen tehokkuus on todistettu vakuuttavasti jopa ihmisen infektion alkuvaiheessa - ensimmäisten 1-2 viikon aikana mahdollisen infektion jälkeen. Monimutkainen hoito, jonka lääkäri valitsee ottamalla huomioon hepatiitin laboratorioanalyysin tulokset, lisää potilaiden mahdollisuuksia täydelliseen toipumiseen.

Kvantitatiivinen PCR-muunnos

Laadullisten PCR-tutkimusten lisäksi on tärkeää tietää hepatiitti B: n kvantitatiivinen parametri - ihmiskehon viruskuormitus. Tämän vuoksi lääkärin on helpompi valita infektion optimaalinen hoito-ohjelma. Määrällistä PCR: ää suositellaan seuraavissa tapauksissa:

  • ennen antiviraalisen hoidon määräämistä - yleinen arvio viruskuormasta;
  • meneillään olevan monimutkaisen hoidon tehokkuuden tarkistaminen - onko viruksen aiheuttajien määrä veressä vähenemässä;
  • tarve määrittää mikro-organismien vastustuskyky lääkärin määräämille lääkkeille;
  • infektion etenemisen varhainen diagnoosi, taudin vakavuuden paheneminen.

Dekoodaa PCR

Useimmissa tapauksissa asiantuntijat suosittelevat sekä kvalitatiivisen että kvantitatiivisen tutkimuksen samanaikaista suorittamista PCR: llä. Tämän avulla saat mahdollisimman informatiivisen tuloksen hepatiitti B: n laboratoriodiagnoosista. Viruskuorman vakioarvot:

  • alle 10x3 - tarttuvat mikro-organismit ovat passiivisia, niiden läsnäolosta on havaittu jälkiä (enintään 200 kopiota / ml);
  • 10x4 - 10x5 - viruksen kuormitus kehoon on minimaalinen;
  • 10x6 alkaen - virus on aktiivinen, mutta luo keskimääräisen kuormituksen maksakudokseen;
  • 10x7 - infektiolla on yksityiskohtainen kliininen kuva, jolla on korkea viruksen aktiivisuus.

Jos PCR-tulos on positiivinen, asiantuntija päättää analyysin kvantitatiivisella parametrilla, missä taudin vaiheessa on:

  • hepatiitti B: n kuljettaminen;
  • krooninen infektio - infektio tapahtui yli 3-6 kuukautta sitten;
  • taudin akuutti jakso - jopa 1-1,5 kuukautta viruspartikkeleiden tunkeutumisesta verenkiertoon.

Jos tutkimuksen PCR-tulos on negatiivinen, voi olla myös kaksi johtopäätöstä - elimistössä ei ole infektiota eikä sitä ole ollut tai henkilö on täysin toipunut esimerkiksi kattavan, oikea-aikaisen viruslääkehoidon jälkeen..

Kenelle on suoritettava PCR hepatiitti B: n varalta

Lääkärit eivät suosittele kaikille ihmisille sellaista ruumiin tutkimusta kuin veren luovuttamista hepatiitti B: n PCR-havaitsemiseksi. Kuten kaikilla muilla lääketieteellisillä toimenpiteillä, viruksen määrän määrittämisellä on omat merkinnänsä:

  • kirurginen toimenpide on edessä;
  • veren ja sen komponenttien verensiirto vaaditaan;
  • raskaus on suunniteltu tai se on jo diagnosoitu;
  • tarve jatkuvasti puhdistaa veri hajoamistuotteista / toksiineista - vaikealla munuaisten vajaatoiminnalla;
  • immuunikatovaisuuden tila - toissijaisten komplikaatioiden poissulkeminen;
  • usein kosketuksissa biologisten materiaalien - lääketieteen ammattilaisten kanssa;
  • optimaalisen maksasairauden hoito-ohjelman valinta;
  • suoritetun viruslääkehoidon tehokkuuden arviointi hepatiitti B: lle.

Valmistautuminen PCR: ään

Luotettavimman tuloksen saavuttamiseksi - onko hepatiitti B todella ihmiskehossa, on valmistauduttava ennen PCR-tutkimuksen suorittamista. Tutkittavaa henkilöä kuultuaan asiantuntija suosittelee seuraavien sääntöjen noudattamista:

  • säädä ruokavaliota - viikko ennen laboratoriossa vierailua kieltäydy rasvaisista, paistetuista, savustetuista ja mausteisista annoksista, on parempi sisällyttää valikkoon enemmän tuoreita vihanneksia hedelmillä, keitoilla ja viljoilla;
  • Vältä 2-3 päivää ennen tutkimusta liiallista fyysistä rasitusta, stressiä ja pidättäydy myös alkoholijuomien juomisesta;
  • muista varoittaa hoitohenkilökuntaa aikaisemmista kirurgisista toimenpiteistä, virus- tai tartuntataudeista, joilla on maksavaurioita, jatkuvasti otetuista lääkkeistä;
  • tutkimuksen aattona yritä levätä hyvin, älä hermostu.

Hepatiitti B: n havaitsemiseksi suoritettavan PCR-testin aamuna sinun tulee tulla laboratorioon lääkärin lähettämällä lomakkeella tyhjään vatsaan, jos tupakoit, älä tupakoi noin 30-40 minuuttia. Laboratorioavustaja ottaa tarvittavan määrän verta laskimosta ja antaa biologisen näytteen testausta varten. Henkilö saa mielipiteen kirjaimellisesti seuraavana päivänä - henkilökohtaisesti. Se on osoitettava hoitavalle lääkärille, jotta oikea diagnoosi voidaan tehdä..

Virheellisen johtopäätöksen mahdollisuus

Tietenkin menettely polymeraasiketjureaktion suorittamiseksi voidaan suorittaa lukuisilla rikkomuksilla, jotka vaikuttavat saadun tuloksen tarkkuuteen. Vaikutukseen vaikuttavat sekä sisäiset tekijät - tutkittavan huonolaatuinen valmistelu että ulkoiset vaikutukset - lämpötilan lasku, kosteus laboratoriossa, biologisen materiaalin saastuminen.

Vääriä positiivisia tuloksia esiintyy naisilla vauvan syntymän aikana - johtuen hormonaalisista häiriöistä kehossa. Tässä tapauksessa hänelle tehdään muita diagnostisia testejä hepatiitti B: n kuljettamisen estämiseksi.

Virheet PCR-tutkimuksissa ovat myös mahdollisia - akuuttien hengitystieinfektioiden aikana, kun otetaan tiettyjä lääkeryhmiä, herpesinfektion, sytomegaloviruksen aiheuttaman infektion vuoksi. Harvemmin laboratoriohenkilöstön epäammattimaisuudella on vaikutusta - verinäytteen saastuminen, jos sitä käsitellään ilman käsineitä tai huonosti käsitellyillä instrumenteilla.

Siksi PCR-menetelmän luottaminen hepatiitti B: n havaitsemiseksi on parempi kuin laboratorio, joka on onnistunut selviytymään tällaisista tutkimuksista vuosikymmenien ajan, työntekijät ovat päteviä ja erittäin ammattitaitoisia.